为培育含油量高的油菜，研究人员尝试利用基因工程等技术获得了转基因油菜品种。回答问题：
（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用PCR技术从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因中获取转运肽基因，所含限制酶（ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ）的酶切位点如图甲所示。
若用ClaⅠClaⅠ和DNA连接DNA连接酶处理酶D基因和转运肽基因后，可得到A端与DD端（填图中字母）相连的重组基因。
（2）将上述重组基因进一步处理，插入图乙所示T质粒的T-DNA中，T-DNA上有SacⅠ、XbaⅠSacⅠ、XbaⅠ限制酶切位点，构建基因表达载体基因表达载体并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含四环素四环素的固体平板上培养得到含重组基因的单菌落，再利用液体培养基振荡培养，可以得到用于转化的侵染液。
（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将重组基因导入油菜细胞利用农杆菌将重组基因导入油菜细胞，进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过植物组织培养植物组织培养技术，可培育成转基因油菜植株，其主要原理是植物细胞的全能性植物细胞的全能性。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】ClaⅠ；DNA连接；D；SacⅠ、XbaⅠ；基因表达载体；四环素；利用农杆菌将重组基因导入油菜细胞；植物组织培养；植物细胞的全能性
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：8引用：1难度：0.7
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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