鱼腥草是一种需求量较大的常用中草药，人工栽培中易感染病菌导致产量降低。科研人员利用基因工程技术将抗菌肽基因转入鱼腥草中提高其抗病性（如图），请回答下列问题。
（1）为获得较多的抗菌肽基因用于操作，需要用PCR技术对抗菌肽基因进行扩增，其原理是 DNA复制DNA复制。对该反应体系中的两种引物的设计要求之一是：两种引物之间不能发生碱基互补配对，防止 引物之间结合形成双链，以免影响引物与 DNA模板链的结合引物之间结合形成双链，以免影响引物与 DNA模板链的结合。
（2）图中①过程为 构建基因表达载体构建基因表达载体，不能将抗菌肽基因直接导入受体细胞的原因是 缺少启动子、终止子，目的基因在受体细胞中不能表达缺少启动子、终止子，目的基因在受体细胞中不能表达。
（3）步骤②中一般情况下需要用Ca2+对农杆菌进行处理，目的是 提高农杆菌吸收重组质粒（外源DNA片段）的能力提高农杆菌吸收重组质粒（外源DNA片段）的能力。影响农杆菌转化效率的因素有 农杆菌的浓度、农杆菌的种类、酚类物质的含量等农杆菌的浓度、农杆菌的种类、酚类物质的含量等（答2点即可）。
（4）经鉴定，转基因成功的标志是 转基因鱼腥草产生有活性的抗菌肽 （或转基因鱼腥草的抗病菌能力得到提高）转基因鱼腥草产生有活性的抗菌肽 （或转基因鱼腥草的抗病菌能力得到提高）。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】DNA复制；引物之间结合形成双链，以免影响引物与 DNA模板链的结合；构建基因表达载体；缺少启动子、终止子，目的基因在受体细胞中不能表达；提高农杆菌吸收重组质粒（外源DNA片段）的能力；农杆菌的浓度、农杆菌的种类、酚类物质的含量等；转基因鱼腥草产生有活性的抗菌肽 （或转基因鱼腥草的抗病菌能力得到提高）
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：22引用：2难度：0.7
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发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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