番茄红素具有一定的药用价值，但普通番茄合成的番茄红素易发生转化（如图甲），科学家设计了一种重组DNA（质粒三），该DNA能表达出双链RNA（发卡），番茄细胞能识别侵入的双链RNA并将该双链RNA及其具有相同序列的单链RNA一起降解，从而提高果实中番茄红素的含量（如图乙）．请分析回答下列问题：
（1）在体外快速大量获得目的基因或含有目的基因的“片段A”可以采用 PCRPCR技术，该技术的原理是 DNA半保留复制DNA半保留复制
（2）根据甲图推知，转录出“发卡”的DNA片段实际上是两个反向连接的 番茄红素环化酶番茄红素环化酶基因，上述过程通过阻止该基因在细胞内的 翻译翻译（填“转录”或“翻译”），提高了果实中番茄红素的含量．
（3）为保证图中的片段A反向连接，处理已开环质粒所用的两种限制酶是 Ecl、BamHⅠEcl、BamHⅠ
（4）去磷酸化是去掉粘性末端最外侧游离的磷酸基团．对已开环的质粒二两端去磷酸化的主要作用是阻止其 自身成环（自身环化）自身成环（自身环化），该DNA分子仍可以和目的基因连接，形成缺少 22个磷酸二酯键的重组质粒，随后在细胞中被修复．
（5）可利用 农杆菌转化农杆菌转化法将质粒三导入植物细胞．
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】PCR；DNA半保留复制；番茄红素环化酶；翻译；Ecl、BamHⅠ；自身成环（自身环化）；2；农杆菌转化
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：17引用：2难度：0.9
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（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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