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如图1表示某生物DNA结构的一部分及限制酶的识别序列和酶切位点,请回答以下问题。

限制酶 EcoRⅠ BamHⅠ HindlⅢ SacⅠ
识别序列和切割位点 GAATTC GGATCC AAGCTT GAGCTC
(1)若目的基因为抗虫基因,需要在连接Ti质粒前进行PCR扩增,需要在样本中再加入
引物、原料(或脱氧核苷酸或dNTP)、酶(Taq酶)
引物、原料(或脱氧核苷酸或dNTP)、酶(Taq酶)
,一般要经历多次循环,每次循环可以分为
变性、复性、延伸
变性、复性、延伸
三步。扩增后切割目的基因,应使用表中的限制酶是
EcoRI和SacI
EcoRI和SacI
,这样做的原因是
可以防止目的基因和Ti质粒自身环化(保证Ti质粒与目的基因的正确连接)
可以防止目的基因和Ti质粒自身环化(保证Ti质粒与目的基因的正确连接)

(2)若目的基因为胰岛素基因,科研人员构建了如图2所示的重组载体,tetr为四环素抗性基因,ampr为氨苄青霉素抗性基因。构建重组载体需要的酶有
DNA连接酶和限制酶
DNA连接酶和限制酶
。在重组质粒上插入大肠杆菌复制原点的目的是
使重组载体能在大肠杆菌中复制扩增
使重组载体能在大肠杆菌中复制扩增
。图2中的启动子上有
RNA聚合酶
RNA聚合酶
的识别和结合位点,从而驱动基因的转录。将重组载体导入大肠杆菌体内后,将其涂布于含
氨苄青霉素
氨苄青霉素
的选择培养基上。

【答案】引物、原料(或脱氧核苷酸或dNTP)、酶(Taq酶);变性、复性、延伸;EcoRI和SacI;可以防止目的基因和Ti质粒自身环化(保证Ti质粒与目的基因的正确连接);DNA连接酶和限制酶;使重组载体能在大肠杆菌中复制扩增;RNA聚合酶;氨苄青霉素
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:36引用:5难度:0.5
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    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:6引用:1难度:0.7
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    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
  • 3.下列有关基因工程的叙述,正确的是(  )

    发布:2024/12/31 5:0:5组卷:3引用:2难度:0.7
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