Bar基因存在于青麻、黑麦草等生物体内，其编码的酶可使除草剂草丁膦失去毒害作用。培育转Bar基因大豆，对于控制豆田杂草有重要意义。为了把Bar基因导入大豆细胞，需将Bar基因插入pUc18质粒中构建中间表达载体，然后与Ti质粒重组为重组表达载体系统。如图为pUc18质粒的结构示意图，回答下列问题：
（1）不能利用黑麦草与大豆进行有性杂交的方法让大豆获得Bar基因，原因是 黑麦草与大豆之间存在生殖隔离黑麦草与大豆之间存在生殖隔离
（2）构建中间表达载体时，为了便于筛选出含有Bar基因的重组质粒，需将Br基因插入到pUc18质粒的 lacZlacZ中形成重组质粒并导入大肠杆菌，然后在添加 氨苄青霉素和Xgal氨苄青霉素和Xgal的培养基上培养大肠杆菌，菌落呈白色的即为含中间表达载体的大肠杆菌。
（3）中间表达载体需插入到Ti质粒的 T-DNAT-DNA中才能将Bar基因整合到植物细胞的染色体DNA上，原因是 T-DNA可转移至受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上T-DNA可转移至受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上。
（4）可通过 显微注射显微注射法直接将重组表达载体导入大豆细胞的原生质体。导入Bar基因的原生质体需 再生出细胞壁再生出细胞壁，经脱分化形成 愈伤组织愈伤组织，再进一步分化才能获得转Bar基因大豆植株。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】黑麦草与大豆之间存在生殖隔离；lacZ；氨苄青霉素和Xgal；T-DNA；T-DNA可转移至受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上；显微注射；再生出细胞壁；愈伤组织
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：23引用：2难度：0.6
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
