如图为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图．复制原点是质粒能正常复制的必需组成．图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离，1Kb=1000个碱基对长度．请据图回答：
（1）质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是缺少标记基因、复制原点被限制酶切割缺少标记基因、复制原点被限制酶切割．
（2）将图中的目的基因与质粒B进行重组，需要用到限制酶（PvuⅠ）和DNA连接酶限制酶（PvuⅠ）和DNA连接酶酶．
如果是两两重组，可能有33种长度的重组结果．
（3）基因工程中检测筛选含有目的基因的重组质粒是一个重要的步骤．现运用EcoRⅠ酶切质粒，完全酶切后进行电泳观察，若出现长度为1.1kb1.1kb和5.6 kb5.6 kb，或者3.1 kb3.1 kb和3.6 kb3.6 kb的片段，则可以判断该质粒已与目的基因重组成功．
（4）若选择自身不含lacZ基因并对抗生素敏感的大肠杆菌作为受体细胞，则在筛选导入成功的受体细胞时应如何操作？在含有氨苄青霉素的培养基上培养经过导入处理的大肠杆菌，若能形成白色菌落的即为导入重组质粒的大肠杆菌在含有氨苄青霉素的培养基上培养经过导入处理的大肠杆菌，若能形成白色菌落的即为导入重组质粒的大肠杆菌．
（5）下列关于质粒运载体的说法正确的是ADFADF（多选）．
A．使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解
B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞
C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则
E．质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的DNA中才能表达
F．没有限制酶就无法使用质粒运载体．
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】缺少标记基因、复制原点被限制酶切割；限制酶（PvuⅠ）和DNA连接酶；3；1.1kb；5.6 kb；3.1 kb；3.6 kb；在含有氨苄青霉素的培养基上培养经过导入处理的大肠杆菌，若能形成白色菌落的即为导入重组质粒的大肠杆菌；ADF
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：19引用：3难度：0.5
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