脑心肌炎病毒（EMCV，其RNA结构如图1）是引起人脑炎和心肌炎的病原体。为研制疫苗，科研人员按图2流程培育转基因酵母菌，来生产EMCV的衣壳蛋白VP1。其中受体酵母菌是组氨酸合成缺陷型，HIS4基因表达的酶催化组氨酸的合成，G418是一种抗生素。请回答下列问题：
（1）衣壳蛋白VP1的合成基因（目的基因）是将EMCV的RNA经过 逆转录逆转录合成DNA，该过程与DNA复制相比，其特有的碱基配对方式为 U=AU=A。
（2）目的基因用PCR进行扩增，结合图1分析，应先用 已知序列3和4已知序列3和4设计引物并扩增，扩增的产物转移到另一试管中进行第二阶段反应，不在同一试管完成的主要原因是 防止引物配对特异性不强造成的非特异性扩增的污染防止引物配对特异性不强造成的非特异性扩增的污染。
（3）直接PCR是一种不经核酸提取而直接使用动物或植物组织等直接进行扩增的PCR技术。下列叙述正确的有 BDBD。
A、Taq酶与模板DNA上的复制原点结合，启动PCR过程
B、该方法无须进行繁琐的标本DNA提纯的预处理
C、该方法变性温度为生物体内的最适温度
D、该方法扩增原核生物DNA的效果可能优于真核生物
图3是直接PCR和常规PCR的电泳图，泳道1最可能是 直接直接PCR结果。
（4）构建重组质粒：将NotⅠ切开的载体与添加同源序列的VP1混合，用特定的DNA酶处理形成质粒--VP1结合体（质粒2）并导入大肠杆菌，利用大肠杆菌中的 DNA聚合酶、DNA连接DNA聚合酶、DNA连接酶等完成质粒的环化。过程③将质粒2导入大肠杆菌除前述目的，还能实现 让其在大肠杆菌中复制让其在大肠杆菌中复制。
（5）线性DNA整合到酵母细胞染色体DNA时，可能是单拷贝整合，也可能是多拷贝整合。过程⑦先将酵母菌培养在缺乏 组氨酸组氨酸的培养基中，筛选获得导入目的基因的酵母菌；然后将筛选出的酵母菌接种于含2mg•L-1G418的培养基中进行培养，选择生长良好的酵母菌再转接到含4mg•L-1G418的培养基中继续培养，其目的是 筛选出目的基因多拷贝整合的酵母菌筛选出目的基因多拷贝整合的酵母菌。
（6）研究人员用兔抗EMCV血清与酵母细胞生产的VP1蛋白进行抗原—抗体免疫反应试验，其目的是 检测酵母细胞生产的VP1与EMCV的VP1的抗原性（结构）是否一致检测酵母细胞生产的VP1与EMCV的VP1的抗原性（结构）是否一致。
【考点】基因工程的操作过程综合；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】逆转录；U=A；已知序列3和4；防止引物配对特异性不强造成的非特异性扩增的污染；BD；直接；DNA聚合酶、DNA连接；让其在大肠杆菌中复制；组氨酸；筛选出目的基因多拷贝整合的酵母菌；检测酵母细胞生产的VP1与EMCV的VP1的抗原性（结构）是否一致
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/6/27 10:35:59组卷：20引用：1难度：0.6
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
