红色荧光蛋白（mScarlet）在细胞内蛋白质的定位和动态示踪等方面有着广泛的应用。研究人员欲构建mScarlet蛋白表达载体，将其转入拟南芥的细胞中表达。回答下列问题：
（1）要扩增mScarlet基因时，需要先设计一对与mScarlet基因两端序列互补配对的引物。为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的 限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶位点。设计引物时，研究人员需要避免引物之间形成 碱基互补配对碱基互补配对而导致引物自连。
（2）质粒作为基因表达的载体，应具备的基本条件有 具有标记基因，能自我复制具有标记基因，能自我复制（答出2点）。除此需要具有启动子和终止子，启动子的作用是 驱动目的基因转录出mRNA驱动目的基因转录出mRNA。
（3）构建含mScarlet基因的表达载体还需要使用DNA连接酶，该酶催化形成的化学键是 磷酸二酯键磷酸二酯键。常见的DNA连接酶中既能连接黏性末端又能连接平末端的是 T4DNA连接酶T4DNA连接酶。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】限制性核酸内切酶；碱基互补配对；具有标记基因，能自我复制；驱动目的基因转录出mRNA；磷酸二酯键；T4DNA连接酶
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：1引用：1难度：0.6
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
