乳糖不耐症是由于乳糖酶（LCT）分泌少，不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的非感染性腹泻。科研工作者利用生物技术培育出转基因低乳糖奶牛新品种，给患乳糖不耐症患者带来福音。如图1为转基因低乳糖奶牛培育流程，图2是使用限制酶BamHⅠ切割DNA产生的结果。请分析回答问题：
（1）科学家在构建重组质粒T时，首先采用PCR技术对LCT基因进行扩增，在扩增目的基因的操作过程中，加入的物质有：模板DNA、引物、4种脱氧核苷酸以及TaqDNA聚合酶（Taq酶）TaqDNA聚合酶（Taq酶）酶；若一个该DNA分子在PCR仪中经过4次循环，需要3030个引物，产物中共有88个等长的LCT基因片段。
（2）图1中的牛胎儿成纤维细胞无法直接发育成个体，需要利用去核卵母细胞构建重组细胞才能培育出新个体，其依据的原理是动物细胞核具有全能性动物细胞核具有全能性。
（3）据图2分析，BamHⅠ的识别序列以及切割位点（用“↓”表示）是
。
（4）图1中，切割质粒S用的酶是BamHⅠ和HindⅢBamHⅠ和HindⅢ，切割后形成1.8kb和8.2kb（1kb=1000对碱基）两种片段。若用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶切割重组质粒T，获得1.6kb和8.8kb两种片段，则转入的LCT基因长度为2.22.2kb。
（5）在转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中，可检测到的物质有ABCABC。（填编号）
A．LCT基因
B．LCTmRNA
C．LCT
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】TaqDNA聚合酶（Taq酶）；30；8；动物细胞核具有全能性；；BamHⅠ和HindⅢ；2.2；ABC
；BamHⅠ和HindⅢ；2.2；ABC【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：20引用：2难度：0.7
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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