潘老师带领同学在暑假以“血红蛋白的提取和分离”为课题,进行了科学实践活动。分析并回答下列问题:
(1)提取血红蛋白的实验材料,选 猪血猪血(填“猪血”或“鸡血”),因为 哺乳动物成熟红细胞中没有细胞核和各种细胞器哺乳动物成熟红细胞中没有细胞核和各种细胞器。
(2)为了防止血液凝固,在采血容器中要预先加入 抗凝剂抗凝剂。
(3)样品处理中红细胞要 生理盐水生理盐水洗涤,并采用低速短时间离心,如此反复三次,直至 上清液不再呈现黄色上清液不再呈现黄色,表明红细胞已经洗涤干净。
(4)将洗涤干净的红细胞置于烧杯中,加入 蒸馏水蒸馏水和 甲苯甲苯使红细胞破裂,释放出血红蛋白。
(5)通过粗分离获得血红蛋白混合液后,可以用凝胶色谱法进一步纯化,此方法能分离蛋白质,根据的是 相对分子质量的大小相对分子质量的大小。
(6)操作时要注意色谱柱的装填不得有气泡。气泡会 搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序降低分离效果。
(7)某研究人员采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对4种不同方法提取出的某蛋白进行分离的结果如图所示。
①SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的原理是 SDS所带负电荷大大超过了蛋白质原有的电荷量SDS所带负电荷大大超过了蛋白质原有的电荷量,因而掩盖了不同种蛋白质间电荷差别,使电泳的迁移率完全取决于 分子的大小分子的大小。
②图中Marker(标样)所起的作用是 对照对照,不同的条带和条带的深浅分别代表 不同的蛋白质和含量的多少不同的蛋白质和含量的多少。
③据图分析,你认为最佳提取方法是 22号,因为 据图可知,对应的条带最多且颜色最深,说明该提取方法获得的蛋白质种类和含量最多据图可知,对应的条带最多且颜色最深,说明该提取方法获得的蛋白质种类和含量最多。
【考点】蛋白质的结构和功能的综合.
【答案】猪血;哺乳动物成熟红细胞中没有细胞核和各种细胞器;抗凝剂;生理盐水;上清液不再呈现黄色;蒸馏水;甲苯;相对分子质量的大小;搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序;SDS所带负电荷大大超过了蛋白质原有的电荷量;分子的大小;对照;不同的蛋白质和含量的多少;2;据图可知,对应的条带最多且颜色最深,说明该提取方法获得的蛋白质种类和含量最多
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:11引用:1难度:0.7