第一代DNA测序技术是由桑格等科学家发明的，又称为链终止法测序，科学家用该技术测定了噬菌体X174的基因组序列，操作流程如图所示，回答下列问题：
（1）将碎片化的DNA片段连接到质粒载体中，需要用到 限制性内切酶限制性内切酶、DNA连接酶DNA连接酶等工具酶。
（2）为保证放射自显影观察条带，应选用 32P32P（填“18O”或“32P”）标记ddNTP。
（3）在凝胶电泳中DNA分子的迁移速率与DNA分子的 DNA分子的大小和构象DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度凝胶的浓度有关。
（4）ddNTP法循环测序中，用到PCR技术，该技术的原理是 DNA的半保留复制DNA的半保留复制，加入ddNTP会使PCR反应终止的原因可能是 连接到子链末端的ddNTP不能再与其它脱氧核苷酸形成3′，5′-磷酸二酯键，导致ddNTP一旦连接到子链末端，子链便停止延伸连接到子链末端的ddNTP不能再与其它脱氧核苷酸形成3′，5′-磷酸二酯键，导致ddNTP一旦连接到子链末端，子链便停止延伸。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】限制性内切酶；DNA连接酶；32P；DNA分子的大小和构象；凝胶的浓度；DNA的半保留复制；连接到子链末端的ddNTP不能再与其它脱氧核苷酸形成3′，5′-磷酸二酯键，导致ddNTP一旦连接到子链末端，子链便停止延伸
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：7引用：2难度：0.7
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1．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
2．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：3引用：3难度：0.7
