如图所示为质粒B和一个含目的基因的DNA片段示意图。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因（能使含该基因的大肠杆菌菌落呈蓝色）。图中EcoRⅠ、PvuⅠ为两种限制酶，括号内的数字表示限制酶切割位点与复制原点的距离。请据图分析并回答问题：
（1）外源基因在受体细胞中能启动表达的关键是载体上具有RNA聚合酶RNA聚合酶识别和结合的部位。
（2）将用限制酶PvuⅠPvuⅠ切开的质粒B溶液与目的基因溶液混合，加入DNA连接酶连接后，导入大肠杆菌。为了便于筛选，作为受体细胞的大肠杆菌自身不含不含（含/不含）lacZ基因和没有没有（有/没有）氨苄青霉素抗性。导入后应从大肠杆菌菌落的颜色和是否抗氨苄青霉素大肠杆菌菌落的颜色和是否抗氨苄青霉素两个角度对受体细胞进行筛选。
（3）将获得的重组质粒用EcoRⅠ完全酶切并进行电泳观察，若出现长度为3.1kb和3.63.6kb的片段，则载体和目的基因反向连接。若出现长度为1.11.1kb 和5.65.6kb的片段，则载体和目的基因正向连接。（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计）
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】RNA聚合酶；PvuⅠ；不含；没有；大肠杆菌菌落的颜色和是否抗氨苄青霉素；3.6；1.1；5.6
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：19引用：2难度：0.7
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