重组酵母乙肝疫苗是一种乙肝表面抗原（HBsAg）亚单位疫苗，如图表示生产疫苗的过程。P质粒上有启动子E和终止子F，并含有多种限制酶（BglⅡ、SacⅠ、SnaBⅠ、AvrⅡ）的识别序列。H序列可将DNA片段整合到某酵母菌染色体中以实现表达。
（1）为确保目的基因能正确插入质粒，设计引物时HBsAg基因两侧A和B位置应考虑包含 SnaBⅠ和AvrⅡSnaBⅠ和AvrⅡ限制酶识别序列。构建重组质粒的工具酶是 限制酶和DNA连接酶限制酶和DNA连接酶重组质粒需有 复制原点复制原点确保其能在大肠杆菌中复制。
（2）启动子E严格地受甲醇的诱导，调控外源基因表达。为筛选重组酵母细胞并使目的基因大量表达，则该酵母菌培养基中需要加入 甲醇、卡那霉素甲醇、卡那霉素。
（3）图中步骤1将重组P质粒导入大肠杆菌的目的是 获得大量HBsAg基因（获得大量重组Р质粒）获得大量HBsAg基因（获得大量重组Р质粒），不直接利用大肠杆菌生产疫苗的原因可能是 大肠杆菌是原核细胞，缺乏内质网和高尔基体对蛋白质进行加工（或“大肠杆菌无法正常转录目的基因”或“大肠杆菌无法正常表达目的基因”）大肠杆菌是原核细胞，缺乏内质网和高尔基体对蛋白质进行加工（或“大肠杆菌无法正常转录目的基因”或“大肠杆菌无法正常表达目的基因”）。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】SnaBⅠ和AvrⅡ；限制酶和DNA连接酶；复制原点；甲醇、卡那霉素；获得大量HBsAg基因（获得大量重组Р质粒）；大肠杆菌是原核细胞，缺乏内质网和高尔基体对蛋白质进行加工（或“大肠杆菌无法正常转录目的基因”或“大肠杆菌无法正常表达目的基因”）
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：22引用：1难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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