大刍草具有较强的耐盐碱能力，该性状与M蛋白有关。科学家通过PCR技术获取和扩增M蛋白基因（如图1）。将获得的大量M蛋白基因与质粒构建基因表达载体，各部分结构如图2所示。
（1）PCR一般可分为变性、复性、延伸变性、复性、延伸三步。据图1分析，PCR过程应选择的引物是 Ⅱ、ⅢⅡ、Ⅲ，引物的作用是 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸。
（2）在M蛋白基因两端设计不同黏性末端的目的是 防止M蛋白基因自身环化，保证M蛋白基因在质粒上正向连接防止M蛋白基因自身环化，保证M蛋白基因在质粒上正向连接。质粒中氨苄青霉素抗性基因的作用是 便于重组DNA分子的筛选便于重组DNA分子的筛选。
（3）为实现质粒和M蛋白基因的高效连接，切割质粒时选用限制酶XmaⅠ而不选用限制酶SmaⅠ的原因是 XmaⅠ酶切出的黏性末端与M蛋白基因黏性末端相同，SmaⅠ的酶切末端为平末端，无法与M蛋白基因的黏性末端连接XmaⅠ酶切出的黏性末端与M蛋白基因黏性末端相同，SmaⅠ的酶切末端为平末端，无法与M蛋白基因的黏性末端连接。为将M蛋白基因连接到质粒上，还需要等酶 BglⅡ、DNA连接酶BglⅡ、DNA连接酶。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】变性、复性、延伸；Ⅱ、Ⅲ；使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸；防止M蛋白基因自身环化，保证M蛋白基因在质粒上正向连接；便于重组DNA分子的筛选；XmaⅠ酶切出的黏性末端与M蛋白基因黏性末端相同，SmaⅠ的酶切末端为平末端，无法与M蛋白基因的黏性末端连接；BglⅡ、DNA连接酶
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/4/20 14:35:0组卷：15引用：1难度：0.4
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
