有研究表明CDKN2B基因与人的寿命有关，科学家将该基因导入小鼠受精卵内，统计其寿命是否高于正常小鼠，图1表示CDKN2B基因与相关限制酶切割位点，该基因转录出的mRNA碱基序列与A链的碱基序列相同（T、U视为相同的碱基），图2为质粒结构的简图，回答下列有关问题：
（1）科学家首先采用PCR技术对目的基因进行扩增。若一个CDKN2B基因在PCR仪中经过4次循环，需要消耗 3030个引物。
（2）科学家在构建基因表达载体的过程中，单独使用限制酶HindⅢ加分别切割目的基因和载体后产生黏性末端。携带CDKN2B基因的重组质粒成功导入细胞后，发现约一半的细胞中没有检测到CDKN2B蛋白，原因是 部分基因反向连接部分基因反向连接。为了避免这种现象的发生，请提出改进措施：同时用PstⅠ、EcoRⅠ分别对目的基因和载体进行酶切同时用PstⅠ、EcoRⅠ分别对目的基因和载体进行酶切。
使用改进后的方法构建重组质粒后，筛选时在培养基中添加的抗生素为 四环素四环素。
（3）若想让一个转入了目的基因的受精卵发育成多个个体，可用 胚胎分割胚胎分割技术，在操作时应选择发育良好、形态正常的 桑葚胚或囊胚桑葚胚或囊胚期的胚胎，分割时还应注意做到 将囊胚的内细胞团均等分割将囊胚的内细胞团均等分割。
【考点】胚胎分割技术．
【答案】30；部分基因反向连接；同时用PstⅠ、EcoRⅠ分别对目的基因和载体进行酶切；四环素；胚胎分割；桑葚胚或囊胚；将囊胚的内细胞团均等分割
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：5引用：2难度：0.7
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