利用转基因的工程菌生产药用蛋白,近些年在我国制药行业中异军突起。图1是基因工程常用的一种质粒;图2是利用该质粒构建的一种基因表达载体。各限制酶质粒上分别只有一处识别序列,将质粒和重组质粒用相应的限制酶酶切后,得到的DNA片段长度如表中数据。请回答下列问题:

质粒 | 重组质粒 | |
BglⅡ | 6.0kb | 7.1kb |
ClaⅠ | 6.0kb | 2.3kb,4.8kb |
PstⅠ | 6.0kb | 1.5kb,5.6kb |
在受体细胞中能自我复制(或整合到受体DNA上,随受体DNA同步复制)、具有标记基因、有一个至多个限制酶切割位点
在受体细胞中能自我复制(或整合到受体DNA上,随受体DNA同步复制)、具有标记基因、有一个至多个限制酶切割位点
,而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有 启动子和终止子
启动子和终止子
。(2)为了获得更多的目的基因,可用PCR扩增,PCR的原理是
DNA的半保留复制
DNA的半保留复制
。PCR反应体系中加入dNTP后,这些物质既可以作为 原料
原料
,也可以为反应提供 能量
能量
。(3)PCR中通常会得到不同的DNA产物,常采用
琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳
法鉴定,不同DNA片段因 相对分子质量、所带电荷
相对分子质量、所带电荷
等不同,在电场中的迁移速率也不同,因而可以形成不同条带。(4)已知质粒被切除的片段长度为0.5kb,则与质粒结合的目的基因长度为
1.6
1.6
kb。质粒上ClaⅠ与PstⅠ区域之间的长度为2.4kb(如图1所示),结合图2分析,目的基因上ClaⅠ、PstⅠ两种限制酶的切割位点分别为 a和b
a和b
(在a、b两点中选填)。(5)培养受体菌时,在培养基中应加入适量的
氨苄青霉素
氨苄青霉素
,可以将导入重组质粒和普通质粒的受体菌都筛选出来。【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】在受体细胞中能自我复制(或整合到受体DNA上,随受体DNA同步复制)、具有标记基因、有一个至多个限制酶切割位点;启动子和终止子;DNA的半保留复制;原料;能量;琼脂糖凝胶电泳;相对分子质量、所带电荷;1.6;a和b;氨苄青霉素
【解答】
【点评】
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