甲型血友病（HA）是血液中凝血因子Ⅷ（FⅧ）遗传性缺陷导致的遗传性出血性疾病，我国科学家利用乳腺特异性表达启动子（α-LA）使重组人凝血因子Ⅷ在家兔中特异且高效的表达。据图回答下列问题：
（1）耐高温的DNA聚合酶进行DNA复制时会沿着子链的5'→3'方向延伸。利用PCR技术对乳腺特异性表达启动子（α-LA）进行扩增时，应该选用图中的引物 2和32和3。四次循环后产生的DNA分子中，只含有一个引物的DNA分子占DNA分子总数的 1818。
（2）构建基因表达载体时，常常会使用两种不同的限制酶处理目的基因和运载体，原因是若使用同一种限制酶，经 DNA连接DNA连接酶连接以后，除了会产生基因表达载体以外，还会有一些特殊的DNA，如 目的基因与目的基因相连、运载体和运载体相连、运载体和目的基因自身环化目的基因与目的基因相连、运载体和运载体相连、运载体和目的基因自身环化（至少答两种）。
（3）将基因表达载体导入受精卵常用的方法是 显微注射技术显微注射技术。将重组细胞培养成胚胎的过程需要培养液，该营养液成分一般比较复杂，除了需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸和血清外，还需要添加 有机盐和无机盐有机盐和无机盐。
（4）将家兔早期胚胎移植到代孕母兔中，因为 受体对移植到子宫的外来胚胎几乎不发生排异反应受体对移植到子宫的外来胚胎几乎不发生排异反应，这样胚胎才能在受体体内存活。为鉴定实验兔的基因组中是否含有人凝血因子Ⅷ基因，一般采用 DNA分子杂交技术DNA分子杂交技术方法。
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【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】2和3；；DNA连接；目的基因与目的基因相连、运载体和运载体相连、运载体和目的基因自身环化；显微注射技术；有机盐和无机盐；受体对移植到子宫的外来胚胎几乎不发生排异反应；DNA分子杂交技术
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【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：19引用：1难度：0.6
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
