基因表达载体的构建是基因工程的核心。图中甲为限制酶EcoRⅠ的识别序列,图乙表示目的基因及限制酶切点,图丙表示目的基因上的DNA片段,图丁表示质粒。请回答下列问题:
(1)从供体真核生物的某组织中获取mRNA,并以此为模板反转录产生多种片段,与载体连接后储存在一个受体菌群中,该受体菌群体叫 cDNAcDNA文库,从该文库中获得的目的基因 不含不含(填“含”或“不含”)启动子、终止子、内含子。
(2)若用图甲所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA,就其专一性而言,切开的是G和A所在的两个 脱氧核苷酸脱氧核苷酸之间的 磷酸二酯磷酸二酯键,即图丙的②处。
(3)为了使目的基因和质粒定向连接,并且有利于受体细胞的筛选,提高重组效率,应该选择的限制酶是PstⅠ和 EcoRⅠEcoRⅠ,如果大肠杆菌是受体细胞,则其体内应不含 抗四环素抗四环素基因,以利于筛选出含质粒的受体菌。
(4)PCR技术扩增图乙中的目的基因时,需要提供模板、Taq酶、dNTPdNTP(原料)、引物C和引物 BB等条件。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】cDNA;不含;脱氧核苷酸;磷酸二酯;EcoRⅠ;抗四环素;dNTP;B
【解答】
【点评】
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