20.肠道病毒71型(EV71)为单股正链RNA病毒,是引起手足口病的主要病原体之一,在EV71中,病毒结构蛋白1(VP1)为主要的中和抗原(中和抗原与中和抗体结合后能阻止病原体入侵与增殖)。如图为利用重组大肠杆菌表达VP1蛋白,并以VP1蛋白为抗原制备单克隆抗体的过程。回答以下问题。
(1)重组大肠杆菌中,由EV71病毒的RNA构建cDNA需经过
过程,随后cDNA通过PCR技术扩增。将目的基因导入大肠杆菌需要构建表达载体,常用的表达载体是
。
(2)在小鼠腹腔内注射VP1蛋白进行免疫,在35天获取B淋巴细胞悬液进行融合。在获取B淋巴细胞前3天需在腹腔再次注射VP1蛋白,这样做的原因是
。
(3)缺失HPRT基因的细胞无法在HAT培养基中生存,HAT培养基可以筛选出骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合的杂交瘤细胞,其它细胞都会死亡。据此推测,在单克隆抗体制备过程中缺失HPRT基因的细胞是
(填“大肠杆菌”“B淋巴细胞”“骨髓瘤细胞”)。
(4)在杂交瘤细胞筛选培养过程中需在培养基中添加胎牛血清,并置于37℃、50mL/LCO
2培养箱中培养。培养箱中CO
2的作用是
。
(5)该单克隆抗体成功制备后,对于防治手足口病有什么作用?