异养反硝化细菌能在无氧环境中将硝酸盐转化为氮（2NO-3+10e-+12H+→…→N2O→N2），该细菌在处理工业污水、治理水体富营养化中具有重要作用。为了筛选出耐高温（42℃）的反硝化细菌菌株，用于提升较高温度的工业污水的脱氮效率，研究人员按照下图的中实验流程进行菌种的筛选研究。回答下列问题：
注：BTB培养基初始pH=6.8；BTB是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件下为蓝色
（1）梯度稀释的目的是 将样液中聚集在一起的微生物分散开来，从而能在培养基表面形成单个的菌落将样液中聚集在一起的微生物分散开来，从而能在培养基表面形成单个的菌落。在试管中加入 无菌水无菌水对样品进行梯度稀释。
（2）制备BTB培养基时，以 硝酸盐硝酸盐为唯一氨源。稀释后的污泥样品可用 平板划线法或稀释涂布平板法平板划线法或稀释涂布平板法（填方法）接种到BTB培养基上，放在 无氧、42℃无氧、42℃环境中培养2～3天后，挑选显 蓝蓝色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。
（3）将纯菌株接种在液体培养基上培养一段时间，若在培养瓶顶空检测到N2O，即可鉴定为目的菌，而不能依据培养液中硝酸盐的浓度降低来鉴定目的菌，理由是 能利用硝酸盐进行代谢的非反硝化细菌也可能使培养液中硝酸盐的浓度降低能利用硝酸盐进行代谢的非反硝化细菌也可能使培养液中硝酸盐的浓度降低。
NO
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3
【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）．
【答案】将样液中聚集在一起的微生物分散开来，从而能在培养基表面形成单个的菌落；无菌水；硝酸盐；平板划线法或稀释涂布平板法；无氧、42℃；蓝；能利用硝酸盐进行代谢的非反硝化细菌也可能使培养液中硝酸盐的浓度降低
【解答】
【点评】
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发布：2024/8/23 6:0:3组卷：4引用：2难度：0.6
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1．回答下列关于微生物的问题．
阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深10～15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01，以下为该菌株的鉴定过程．
（1）为获得单菌落，可采用平板划线法或法将初筛菌液接种在培养基上．46SM01菌落为粉白色，初期呈突起絮状，在显微镜下观察到，菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1μm,初步推测为真菌，则其特征中，最能说明SM01是真菌的是有细胞核，且有分生孢子．SM01还一定具有的结构有（多选）．
A．细胞膜 B．核糖体 C．拟核 D．荚膜
（2）表中培养液pH均为6.0，若对SM01中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因：
①缺少，SM01不能很好生长
②具有，会影响对SM01自身产生的酶活力的测定结果
③缺乏，会影响SM01的生长，也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定．
表 试验用培养液配方培养液 阿拉伯胶 阿拉伯胶酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4•7H2O KCl FeSO4•7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L发布：2025/1/2 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列叙述错误的是（ ）
发布：2024/12/31 4:0:1组卷：17引用：3难度：0.7 -
3．为了防治大气污染，烟气脱硫是环保领域迫切需要解决的问题．研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，并了解其生长规律，进行了如下操作．请回答下列问题：
（1）采样与细菌的筛选：在某热电厂烟囱周围区域要尽量做到采集土样．为确保能够从样品中分离到所需要的烟气脱硫细菌，可以通过增加脱硫菌的浓度．
（2）驯化脱硫细菌：将筛选出的脱硫细菌接种于有少量无菌水的三角瓶中，边搅拌边持续通入SO2气体几分钟，然后接种到培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通SO2的时间，同时逐步降低培养基的pH．此操作的目的是分离出的脱硫细菌．
（3）培养与观察：一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），驯化后的脱硫细菌表现出稳定的特征．用高倍显微镜（填“可以”或“不可以”）观察到脱硫细菌的核糖体．
（4）探究生长规律：在计数时，计数方法有稀释涂布平板法和直接计数法．在用稀释涂布平板法进行计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的；通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，通常推测统计的菌落数往往比活菌的实际数目．发布：2025/1/1 8:0:2组卷：6引用：2难度：0.5
