新冠病毒核酸检测的原理为实时荧光定量PCR(qPCR)检测法,技术流程如图所示,在PCR扩增时加入能与目的基因(新冠病毒的N基因)结合的荧光探针,①②③表示相关步骤。回答下列问题:

(1)qPCR过程中,需先以RNA为模板合成cDNA,故装置中需添加酶 逆转录酶逆转录酶。为确保新冠病毒核酸检测的准确性,在设计PCR引物时必须依据新冠病毒RNA中的 特异性核苷酸序列特异性核苷酸序列来进行。PCR过程每次循环分为3步,其中温度最低的一步是 复性复性。
(2)根据荧光探针功能分析,荧光探针中碱基序列的设计应主要依据。在配制PCR扩增液时,加入的荧光探针序列为5'-TTGCT……AGATT-3',如果模板中存在N基因序列,与探针结合的序列应该是5'-新冠病毒的N基因的碱基序列—AATCT……AGCAA—新冠病毒的N基因的碱基序列—AATCT……AGCAA—-3'。如果某人没有感染新冠病毒,则进行PCR时DNA实时荧光信号强度 不变不变(填“增强”“减弱”或“不变”)。
(3)还可对新冠病毒进行免疫学检测,向小鼠体内注射新冠病毒S蛋白(决定病毒入侵易感细胞的关键蛋白)后分离产生的B淋巴细胞,并与小鼠的骨髓瘤细胞融合,常用的融合方法有 PEG融合/灭活病毒诱导融合法PEG融合/灭活病毒诱导融合法(答出1种);再经多次筛选、检测,获得杂交瘤细胞,该种细胞的特点是 既能迅速大量增殖,又能产生与S蛋白特异性结合的专一抗体既能迅速大量增殖,又能产生与S蛋白特异性结合的专一抗体。在体外条件下做大规模培养,获得大量可与S蛋白特异性结合的单克隆抗体作为诊断试剂。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定;单克隆抗体及其应用.
【答案】逆转录酶;特异性核苷酸序列;复性;新冠病毒的N基因的碱基序列—AATCT……AGCAA—;不变;PEG融合/灭活病毒诱导融合法;既能迅速大量增殖,又能产生与S蛋白特异性结合的专一抗体
【解答】
【点评】
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发布:2024/7/31 8:0:9组卷:27引用:4难度:0.6
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