如图表示某种绿色荧光蛋白基因表达载体的构建过程，绿色荧光蛋白基因有820个碱基对（bp），质粒有5369个碱基对（bp）。请据图回答问题：
（1）上述基因表达载体的构建过程需要的基本工具包括：限制酶、DNA连接酶、运载体限制酶、DNA连接酶、运载体。过程①②用相同的两种限制酶切割，与单一酶切相比的优势有 可以避免目的基因自身环化、使目的基因定向插入到运载体中可以避免目的基因自身环化、使目的基因定向插入到运载体中。
（2）过程②目的基因的扩增可通过PCR技术实现，进行PCR时除提供DNA母链，4种脱氧核苷酸，还需 Taq酶和人工合成的引物Taq酶和人工合成的引物等基本条件（至少填两个）。PCR可成指数形式扩增目的基因，每个循环一般可分为 变性、退火、延伸变性、退火、延伸。
（3）已知图中质粒经BamHⅠ、HindⅢ双酶切后进行电泳，若出现了一条长度为5150bp的DNA条带，则重组质粒的长度为 59705970的DNA片段条带。
（4）若想获得发绿色荧光的小鼠，可将重组质粒用 显微注射显微注射法导入小鼠的 受精卵受精卵（细胞）中。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】限制酶、DNA连接酶、运载体；可以避免目的基因自身环化、使目的基因定向插入到运载体中；Taq酶和人工合成的引物；变性、退火、延伸；5970；显微注射；受精卵
【解答】
【点评】
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发布：2024/10/1 1:0:2组卷：9引用：2难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
