研究人员将大麦细胞的LTP1基因导入啤酒酵母菌中,获得的啤酒酵母菌可产生LTP1蛋白,并酿出泡沫更加丰富的啤酒,如图为转基因啤酒酵母的生产过程。回答下列问题:
(1)已知DNA复制时子链的延伸方向是5'→3',图1中A、B、C、D在不同情况下均可以作为引物,用PCR技术扩增LTP1基因时应该选用 B、CB、C作为引物。
(2)构建基因表达载体构建基因表达载体是实施基因工程的核心。图2中的B为质粒,质粒和LTP1基因结合形成重组质粒C。重组质粒C在受体细胞中能够稳定存在并发挥作用,在LTP1基因的首端必须具有 启动子启动子,尾端必须具有终止子,还必须含有标记基因和目的基因。
(3)为检测目的基因在受体细胞基因组中的整合情况,首先采用DNA分子杂交技术检测LTP1基因是否导入成功,需要从转基因啤酒酵母中提取DNA,用 标记的目的基因(LTP1基因)标记的目的基因(LTP1基因)作探针与之杂交。
(4)为检测转基因啤酒酵母是否产生LTP1蛋白,除检测LTP1蛋白是否产生及含量外,还可观察转基因啤酒酵母所酿啤酒的 泡沫丰富程度泡沫丰富程度进行判断,若能检测到LTP1蛋白,但效果差,可能的原因是 LTP1基因表达效率低,合成的LTP1蛋白少LTP1基因表达效率低,合成的LTP1蛋白少;若经检测确定细胞中无LTP1蛋白,可采用PCR技术检测细胞中的RNA,如果能检测到mRNA,则可能是 未能正常翻译未能正常翻译;如果检测后确定细胞中无LTP1蛋白的mRNA,但之前能检测到LTP1基因,则LTP1基因未能正常转录的原因可能是 LTP1基因反向插入质粒DNA分子中LTP1基因反向插入质粒DNA分子中。
【考点】基因工程的操作过程综合;DNA片段的扩增与电泳鉴定.
【答案】B、C;构建基因表达载体;启动子;标记的目的基因(LTP1基因);泡沫丰富程度;LTP1基因表达效率低,合成的LTP1蛋白少;未能正常翻译;LTP1基因反向插入质粒DNA分子中
【解答】
【点评】
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