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水蛭素是一种小分子蛋白质,其对凝血酶有极强的抑制作用,是迄今为止所发现的最强凝血酶天然特异抑制剂。通过基因工程技术生产水蛭素的方法如下图所示。请据图回答:

(1)过程①需要的原料是
脱氧核苷酸(dNTP或dATP、dGTP、dCTP、dTTP)
脱氧核苷酸(dNTP或dATP、dGTP、dCTP、dTTP)
,过程③必需的酶有
限制酶和DNA连接酶
限制酶和DNA连接酶
,过程④为提高导入效率,常用
CaCl2
CaCl2
溶液处理大肠杆菌。
(2)过程②中可通过
PCR
PCR
技术大量扩增水蛭素基因,被扩增的水蛭素基因必须有一段核苷酸序列是已知的,以便根据这一序列合成
引物
引物

(3)水蛭素基因不含质粒图谱中限制酶识别序列。为使水蛭素基因重组进该质粒,水蛭素基因两端需分别加入不同限制酶
AscⅠ
AscⅠ
BamHⅠ
BamHⅠ
的识别序列。
(4)在导入重组质粒后,过程⑤为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加
卡那霉素
卡那霉素
的培养基进行培养。

【答案】脱氧核苷酸(dNTP或dATP、dGTP、dCTP、dTTP);限制酶和DNA连接酶;CaCl2;PCR;引物;AscⅠ;BamHⅠ;卡那霉素
【解答】
【点评】
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发布:2024/9/12 0:0:8组卷:254引用:2难度:0.7
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括
     
     

    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
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