研究发现作物M的品系甲有抗虫等多种优良性状,但甜度不高。为了改良品系甲,增加其甜度,育种工作者做了如下实验:从品系乙中提取与甜度有关的s基因,通过基因重组技术,以Ti质粒为载体,以品系甲的叶片为受体细胞,培育出转s基因的新品系。
回答下列问题:
(1)利用PCR技术从品系乙的基因组中获取S基因时,需要在一定的缓冲液中才能进行,需提供引物、原料外,还需提供的物质有 耐高温的DNA聚合酶、DNA模板耐高温的DNA聚合酶、DNA模板用于获取S基因的引物需满足的条件是 能与S基因母链的一段碱基序列互补配对、短单链核酸能与S基因母链的一段碱基序列互补配对、短单链核酸利用PCR获取目的基因过程中,4种脱氧核苷酸加 3'3'(填“3′”或“5′”)端。
(2)如图是S基因和载体的限制性内切核酸酶切点。为了成功构建基因表达载体,确保目的基因插入载体中方向正确,最好选用 XbaⅠ、HindⅢXbaⅠ、HindⅢ酶切割S基因和载体;由图可知,构建表达载体时,S基因是插入在T-DNA上,T-DNA的作用是 T-DNA可转移到被侵染的细胞,并将其整合到该细胞的染色体DNA上T-DNA可转移到被侵染的细胞,并将其整合到该细胞的染色体DNA上。

(3)若要通过实验检测S基因在转基因植物中表达出目的蛋白,请简要写实验思路 从品系甲相应细胞中提取S蛋白,使用相应抗体进行抗原-抗体杂交,检测是否出现杂交带从品系甲相应细胞中提取S蛋白,使用相应抗体进行抗原-抗体杂交,检测是否出现杂交带。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】耐高温的DNA聚合酶、DNA模板;能与S基因母链的一段碱基序列互补配对、短单链核酸;3';XbaⅠ、HindⅢ;T-DNA可转移到被侵染的细胞,并将其整合到该细胞的染色体DNA上;从品系甲相应细胞中提取S蛋白,使用相应抗体进行抗原-抗体杂交,检测是否出现杂交带
【解答】
【点评】
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发布:2024/8/21 7:0:1组卷:6引用:1难度:0.5
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