1965年中国科学家人工合成了具有生物活性的结晶牛胰岛素，摘取了人工合成蛋白质的桂冠，如图是利用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。请回答下列问题。
（1）质粒上ori序列的碱基特点是 A和TA和T比值较高，图示胰岛素基因的转录以 ②②链作为模板。
（2）在设计PCR引物时最好在引物的 5′5′端添加限制酶 EcoRⅠ和XhoⅠEcoRⅠ和XhoⅠ的识别序列，PCR反应体系中引物的延伸需要TaqDNA聚合酶，此酶需要 Mg2+Mg2+（离子）的激活。
（3）生产过程中目的基因是利用胰岛B细胞中的mRNA反转录得到的胰岛素基因，不直接使用细胞中酶切获得的的胰岛素基因原因是 胰岛B细胞中的mRNA逆转录得到的胰岛素基因中无内含子序列。能够在大肠杆菌中表达正确的蛋白质胰岛B细胞中的mRNA逆转录得到的胰岛素基因中无内含子序列。能够在大肠杆菌中表达正确的蛋白质。
（4）科学家运用大引物PCR定点突变技术对胰岛素第28位氨基酸实现了替换，获得了速效胰岛素类似物产品。相关原理如图所示。
①第一次PCR至少需要 22个循环才能获得相应的大引物模板，第二次PCR应选用大引物两条链中的 BB（填“A”或“B”），若第二次PCR计划循环n次，至少需要大引物 2n-12n-1个。
②β-半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。将转化后的大肠杆菌接种到添加了 氨苄青霉素和X-ga1氨苄青霉素和X-ga1的培养基上，若观察到菌落呈现白色，则表明 该菌落即为含有重组质粒的大肠杆菌菌落该菌落即为含有重组质粒的大肠杆菌菌落。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】A和T；②；5′；EcoRⅠ和XhoⅠ；Mg2+；胰岛B细胞中的mRNA逆转录得到的胰岛素基因中无内含子序列。能够在大肠杆菌中表达正确的蛋白质；2；B；2n-1；氨苄青霉素和X-ga1；该菌落即为含有重组质粒的大肠杆菌菌落
【解答】
【点评】
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发布：2024/10/12 15:0:1组卷：25引用：4难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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