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螟虫和稻纵卷叶螟等鳞翅目害虫是水稻生产上的主要害虫,是导致水稻减产的主要原因之一。大量使用化学杀虫剂,严重影响生态环境和生物多样性,加大人体中毒几率。转基因抗虫水稻“华恢1号”由华中农业大学培育。种植这种转基因抗虫水稻,可以基本解决鳞翅目害虫问题,使水稻农药使用量减少30%-50%,产生明显的经济和生态效益。
Ⅰ、图1是获取Bt毒蛋白基因的流程,结合所学知识及相关信息回答下列问题:

(1)图中基因组文库
大于
大于
cDNA文库(填“大于”或者“小于”),B过程是
反转录酶
反转录酶

(2)为获得大量的目的基因,可以用
PCR
PCR
技术进行扩增,该过程所用酶是
热稳定DNA聚合酶
热稳定DNA聚合酶
。还需根据目的基因两端的部分碱基序列设计特异引物,若其中一种引物一共用了31个,则目的基因最多扩增了
5
5
次。
(3)杀虫基因能在水稻体内稳定遗传的关键是
插入(整合)到染色体上的DNA中
插入(整合)到染色体上的DNA中
,可以用DNA分子杂交技术进行检验。
Ⅱ、图2表示“华恢1号”抗虫水稻主要培育流程
(1)若受体细胞为水稻体细胞可采用
植物组织培养
植物组织培养
技术获得转基因植物体,该技术所依据的原理是
植物细胞的全能性
植物细胞的全能性

(2)杀虫基因(crylA)是根据几种Bt毒蛋白的分子结构,设计并人工合成的,这属于
蛋白质
蛋白质
工程技术范畴。
(3)组建理想的基因表达载体需要对天然的质粒进行改造。图3是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(示部分基因及部分限制酶作用位点),据图3分析:
①人工改造质粒时,要使抗虫基因能成功表达,还应插入
启动子
启动子

②分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养转化后的水稻胚细胞,观察到的细胞生长的情况是在含卡那霉素的培养基中能够生长,而在含四环素的培养基中不能生长。说明
重组DNA有卡那霉素的标记基因,没有抗四环素的标记基因
重组DNA有卡那霉素的标记基因,没有抗四环素的标记基因

【答案】大于;反转录酶;PCR;热稳定DNA聚合酶;5;插入(整合)到染色体上的DNA中;植物组织培养;植物细胞的全能性;蛋白质;启动子;重组DNA有卡那霉素的标记基因,没有抗四环素的标记基因
【解答】
【点评】
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发布:2024/12/29 8:0:2组卷:4引用:1难度:0.3
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括
     
     

    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
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