“蓝白斑筛选”是一种基于质粒载体的DNA重组技术，它可通过改变质粒载体中的DNA序列，实现对菌落颜色的调控，如图所示。回答下列问题：
| 氨苄青霉素 | |
| 未导入质粒 | × |
| 导入空白质粒 | √蓝色菌落 |
| 导入重组质粒 | √白色菌落 |
磷酸二酯键
磷酸二酯键
。该重组质粒除具有外源DNA、标记基因外，还具有的结构有复制原点、启动子
启动子
、终止子等。（2）将重组质粒转入大肠杆菌前，需在低温、低浓度的
Ca2+
Ca2+
溶液中处理大肠杆菌，目的是 使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（使大肠杆菌细胞处于感受态）
使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（使大肠杆菌细胞处于感受态）
。在转化过程中，实际转化效率介于50%～85.7%，推测原因可能与 重组质粒的浓度、反应时间、受体菌的生理状态和浓度等
重组质粒的浓度、反应时间、受体菌的生理状态和浓度等
（答两点）有关。（3）在筛选导入重组质粒的大肠杆菌时，培养基中应加入
氨苄青霉素、X-Gal
氨苄青霉素、X-Gal
。培养一段时间的平板上，含有重组质粒的大肠杆菌菌落呈白色的原因是 外源DNA破坏了LacZ基因的结构，使其无法表达产生β-半乳糖苷酶，培养基中无色的X-Gal不能被分解
外源DNA破坏了LacZ基因的结构，使其无法表达产生β-半乳糖苷酶，培养基中无色的X-Gal不能被分解
。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】磷酸二酯键；启动子；Ca2+；使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（使大肠杆菌细胞处于感受态）；重组质粒的浓度、反应时间、受体菌的生理状态和浓度等；氨苄青霉素、X-Gal；外源DNA破坏了LacZ基因的结构，使其无法表达产生β-半乳糖苷酶，培养基中无色的X-Gal不能被分解
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/15 8:0:8组卷：18引用：2难度：0.5
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（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
