中国农业大学国家玉米改良中心采用基因工程技术将从A生物分离出的抗虫基因导入玉米细胞，培育出的抗虫玉米ND207能够抗玉米螟、黏虫、棉铃虫等玉米主要鳞翅目害虫，并能有效减轻草地贪夜蛾带来的危害。回答下列问题。
基因工程的操作程序主要包括四个步骤：
（1）第一步：

目的基因的获取

目的基因的获取

。人从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是限制酶，主要存在于

原核生物

原核生物

中，其特点是

能识别特定的脱氧核苷酸序列并在特定位点切断DNA

能识别特定的脱氧核苷酸序列并在特定位点切断DNA

。
（2）第二步：

基因表达载体的构建

基因表达载体的构建

。一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、

终止子

终止子

以及标记基因。标记基因的作用是

重组DNA的鉴定和选择（鉴别受体细胞中是否含有目的基因，并加以筛选）

重组DNA的鉴定和选择（鉴别受体细胞中是否含有目的基因，并加以筛选）

。
（3）第三步：

将目的基因导入受体细胞

将目的基因导入受体细胞

。将目的基因导入植物细胞采用的方法是

农杆菌转化法

农杆菌转化法

；将目的基因导入动物细胞采用最多的方法是

显微注射法

显微注射法

；将目的基因导入微生物细胞以大肠杆菌应用最为广泛，大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：先用

钙离子（氯化钙）

钙离子（氯化钙）

处理细胞，使细胞处于一种能吸收环境中DNA的生理状态，这种状态的细胞被称作感受态细胞。
第四步：目的基因的检测与鉴定。