二十碳五烯酸（EPA）能促进体内饱和脂肪酸代谢，是人体自身不能直接从头合成但又不可缺少的营养物质。获取EPA产品的主要途径是从鱼油等海洋渔业资源中提取。研究人员利用转基因技术从海洋细菌中提取了EPA合成途径的关键基因pfaB，并将其导入酵母菌内，通过酵母菌发酵生产EPA，相关过程如图所示，请回答下列问题：
（1）PCR技术遵循的基本原理是 DNA半保留复制DNA半保留复制，在第 三三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段（pfaB基因）。
（2）利用PCR扩增pfaB基因时，需将温度上升到90℃后再降温至50℃，其目的是 使pfaB基因双链解旋为单链后，便于引物与模板链通过碱基互补配对原则结合使pfaB基因双链解旋为单链后，便于引物与模板链通过碱基互补配对原则结合。
（3）表达载体含有启动子，启动子是指 位于基因首端的一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶识别及结合的部位，能驱动基因转录出mRNA位于基因首端的一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶识别及结合的部位，能驱动基因转录出mRNA。
（4）将pfaB-pPIC9表达载体导入酵母菌前，需先将表达载体导入大肠杆菌并进行筛选，筛选时培养基中应加入 氨苄青霉素氨苄青霉素，再将含有表达载体的大肠杆菌与酵母菌置于电转杯中，通过电激将大肠杆菌导入酵母菌，该表达载体在酵母菌中不会随着酵母菌繁殖而丢失的原因是 表达载体上含有真核生物复制原点，能在酵母菌中复制表达载体上含有真核生物复制原点，能在酵母菌中复制。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】DNA半保留复制；三；使pfaB基因双链解旋为单链后，便于引物与模板链通过碱基互补配对原则结合；位于基因首端的一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶识别及结合的部位，能驱动基因转录出mRNA；氨苄青霉素；表达载体上含有真核生物复制原点，能在酵母菌中复制
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/7 8:0:9组卷：0引用：1难度：0.6
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1．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
2．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：4引用：3难度：0.7
