人乳铁蛋白是一种药用保健蛋白。如图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，请回答以下问题：
（1）图中Tetr和Ampr两基因是质粒中的 标记基因标记基因，作用是 便于重组DNA分子的筛选便于重组DNA分子的筛选。
（2）构建基因表达载体，需要将人乳铁蛋白基因嵌入到 启动子和终止子启动子和终止子之间，才能使乳铁蛋白基因在牛乳腺细胞中表达。
（3）五种限制酶的识别序列及切割位点如下表所示，要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是 Sau3AⅠSau3AⅠ。
| 限制酶 | BamHⅠ | HaeⅢ | BclⅠ | Sau3AⅠ | NotⅠ |
| 识别序列及切割位点 | G↓GATCC CCTAG↑G |
GG↓CC CC↑GG |
T↓GATCA ACTAG↑T |
↓GATC CTAG↑ |
GC↓GGCCGC CGCCGG↑CG |
氨苄青霉素
氨苄青霉素
（填“四环素”“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”）的培养基上进行，原因是 用限制酶切割后破坏了Tetr基因，但不会破坏Ampr基因，导入重组质粒的受体细胞（对氨苄青霉素具有抗性），能在含氨苄青霉素的培养基上生存下来
用限制酶切割后破坏了Tetr基因，但不会破坏Ampr基因，导入重组质粒的受体细胞（对氨苄青霉素具有抗性），能在含氨苄青霉素的培养基上生存下来
。筛选出的重组质粒导入牛受精卵，①过程常用的方法是 显微注射法
显微注射法
。（5）培养出早期胚胎后，科学家欲进行胚胎分割移植，则应该选择发育良好、形态正常的
桑葚胚或囊胚
桑葚胚或囊胚
，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分割针进行分割。检测转基因牛乳汁中是否含有人乳铁蛋白，可采用 抗原抗体杂交
抗原抗体杂交
技术。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】标记基因；便于重组DNA分子的筛选；启动子和终止子；Sau3AⅠ；氨苄青霉素；用限制酶切割后破坏了Tetr基因，但不会破坏Ampr基因，导入重组质粒的受体细胞（对氨苄青霉素具有抗性），能在含氨苄青霉素的培养基上生存下来；显微注射法；桑葚胚或囊胚；抗原抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/19 8:0:9组卷：24引用：2难度：0.5
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
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（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
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