《本草纲目》记载，“蝉花可治疗惊痫，夜啼心悸，功同蝉蜕”。蝉花是蝉拟青霉寄生于蝉若虫后形成的虫菌复合体，内含虫草多糖、甘露醇及必需氨基酸等成分。为提高产量，研究人员拟从天然蝉花中分离纯化蝉拟青霉菌株进行人工培养。请回答问题。
（1）制备培养基：
①该实验选择马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基，配方如下：马铃薯200g,葡萄糖20g,KH2PO42g,MgSO40.5g,琼脂20g,用蒸馏水定容至1000mL，自然pH。该培养基中的马铃薯可为微生物生长提供 碳源、氮源、无机盐碳源、氮源、无机盐等营养成分（至少写出2种），自然 pH为 酸酸性范围。
②从培养菌种的角度分析，PDA培养基与牛肉膏蛋白胨培养基的主要区别是 PDA一般用于培养真菌，牛肉膏蛋白胨培养基一般用来培养细菌PDA一般用于培养真菌，牛肉膏蛋白胨培养基一般用来培养细菌。
③为了便于筛选蝉拟青霉菌株，培养基中还应加入青霉素以抑制 细菌细菌的生长；按培养基功能划分，该培养基属于 选择选择培养基。
（2）蝉花真菌的分离、纯化：
①取新鲜蝉花，用体积分数为70%的酒精进行 消毒消毒，取虫体胸腔中的少许菌丝切成1mm左右长，接种至PDA培养基，然后置于25℃的 恒温培养箱恒温培养箱中培养3～5d,形成菌落。
②待菌落直径长至0.2～0.5cm时挑选少量菌丝，采用 平板划线法/稀释涂布平板平板划线法/稀释涂布平板法接种至 PDA培养基上进行纯化，纯化2～4次，确定无杂菌后，可采用甘油管藏的方法进行 （长期）保存（长期）保存。
（3）发酵生产：检测蝉花真菌发酵所用的液体培养基是否彻底灭菌，常用方法是 取少量发酵所用的液体培养基涂布到牛肉膏蛋白胨固体培养基（或完全培养基）上，适宜温度下培养一段时间，观察有无菌落产生/取少量液体培养基不进行接种，直接进行培养取少量发酵所用的液体培养基涂布到牛肉膏蛋白胨固体培养基（或完全培养基）上，适宜温度下培养一段时间，观察有无菌落产生/取少量液体培养基不进行接种，直接进行培养。
【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）．
【答案】碳源、氮源、无机盐；酸；PDA一般用于培养真菌，牛肉膏蛋白胨培养基一般用来培养细菌；细菌；选择；消毒；恒温培养箱；平板划线法/稀释涂布平板；（长期）保存；取少量发酵所用的液体培养基涂布到牛肉膏蛋白胨固体培养基（或完全培养基）上，适宜温度下培养一段时间，观察有无菌落产生/取少量液体培养基不进行接种，直接进行培养
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/13 8:0:9组卷：18引用：1难度：0.6
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1．回答下列关于微生物的问题．
阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深10～15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01，以下为该菌株的鉴定过程．
（1）为获得单菌落，可采用平板划线法或法将初筛菌液接种在培养基上．46SM01菌落为粉白色，初期呈突起絮状，在显微镜下观察到，菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1μm,初步推测为真菌，则其特征中，最能说明SM01是真菌的是有细胞核，且有分生孢子．SM01还一定具有的结构有（多选）．
A．细胞膜 B．核糖体 C．拟核 D．荚膜
（2）表中培养液pH均为6.0，若对SM01中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因：
①缺少，SM01不能很好生长
②具有，会影响对SM01自身产生的酶活力的测定结果
③缺乏，会影响SM01的生长，也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定．
表 试验用培养液配方培养液 阿拉伯胶 阿拉伯胶酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4•7H2O KCl FeSO4•7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L发布：2025/1/2 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列叙述错误的是（ ）
发布：2024/12/31 4:0:1组卷：17引用：3难度：0.7 -
3．为了防治大气污染，烟气脱硫是环保领域迫切需要解决的问题．研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，并了解其生长规律，进行了如下操作．请回答下列问题：
（1）采样与细菌的筛选：在某热电厂烟囱周围区域要尽量做到采集土样．为确保能够从样品中分离到所需要的烟气脱硫细菌，可以通过增加脱硫菌的浓度．
（2）驯化脱硫细菌：将筛选出的脱硫细菌接种于有少量无菌水的三角瓶中，边搅拌边持续通入SO2气体几分钟，然后接种到培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通SO2的时间，同时逐步降低培养基的pH．此操作的目的是分离出的脱硫细菌．
（3）培养与观察：一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），驯化后的脱硫细菌表现出稳定的特征．用高倍显微镜（填“可以”或“不可以”）观察到脱硫细菌的核糖体．
（4）探究生长规律：在计数时，计数方法有稀释涂布平板法和直接计数法．在用稀释涂布平板法进行计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的；通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，通常推测统计的菌落数往往比活菌的实际数目．发布：2025/1/1 8:0:2组卷：6引用：2难度：0.5
