人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白，需经过内质网和高尔基体加工后才具备活性。如图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的部分过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。回答下列问题：
| 限制酶 | BamHⅠ | HaeⅢ | BclⅠ | Sau3AⅠ | NotⅠ |
| 识别序列及切割位点 | G↓GATCC CCTA↑GG |
GG↓CC CC↑GG |
T↓GATCA ACTAG↑T |
↓GATC CTAG↑ |
GC↓GGCCGC CGCCGG↑CG |
（1）图中质粒上的Ampr和Tetr是
标记基因
标记基因
，作用是 筛选出含有目的基因的受体细胞
筛选出含有目的基因的受体细胞
。（2）若选用牛作为转基因动物，可通过
显微注射
显微注射
方法将基因表达载体导入受精卵中，然后使其发育成转基因动物。（3）据图分析，筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含
氨苄青霉素
氨苄青霉素
的培养基上进行，能在该培养基生长的受体细胞可能已经导入重组质粒。（4）要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是
Sau3AⅠ
Sau3AⅠ
若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接起来，形成有6个碱基对序列的连接部位，对于该部位，这两种酶 都不能
都不能
（填“都不能”或“只有一种能”）切开。（5）利用转基因大肠杆菌（工程菌）不能生产有活性的人乳铁蛋白，这是因为
大肠杆菌为原核生物，无内质网和高尔基体，不具备加工人乳铁蛋白的能力
大肠杆菌为原核生物，无内质网和高尔基体，不具备加工人乳铁蛋白的能力
。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】标记基因；筛选出含有目的基因的受体细胞；显微注射；氨苄青霉素；Sau3AⅠ；都不能；大肠杆菌为原核生物，无内质网和高尔基体，不具备加工人乳铁蛋白的能力
【解答】
【点评】
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发布：2024/8/14 2:0:1组卷：5引用：2难度：0.6
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发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
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（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
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