大豆是重要的油料作物之一，在我国有悠久的种植历史。为进一步提高大豆的品质和含油量，科研人员发现拟南芥细胞中存在某种转录因子能够明显提高其他基因的表达水平。研究人员将从拟南芥细胞中获取的转录因子转移到大豆细胞内，并使其过量表达，发现大豆中油酸和亚油酸的含量显著提高。图中限制酶EcoRⅤ的酶切位点为-GAT↓ATC-。回答下列问题：
（1）采用PCR技术进行可以扩增目的基因，PCR过程利用的原理是 DNA半保留复制DNA半保留复制。
（2）质粒P0具有氨苄青霉素抗性基因（Ampr）和四环素抗性基因（Tetr），对其进行切割时应该注意 所选限制酶识别的序列不能同时存在于氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因之中（限制酶不能同时切割氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因）所选限制酶识别的序列不能同时存在于氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因之中（限制酶不能同时切割氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因），以便筛选重组质粒。研究人员利用限制酶EeoRV对载体进行处理后 不能不能（填“能”或“不能”）与目的基因片段直接相连。
（3）P3质粒导入受体细胞通常使用农杆菌转化法，转化指的是目的基因进入受体细胞，并在受体细胞内 维持稳定和表达维持稳定和表达的过程，若受体细胞能够表现氨苄青霉素抗性，能否说明目的基因已成功导入受体细胞，并说出理由：不能，有可能是导入了不含目的基因的P0质粒不能，有可能是导入了不含目的基因的P0质粒。
（4）导入重组质粒的受体细胞还需经过 脱分化脱分化和再分化过程，才能形成植株，在此过程中，受体细胞能够培育出转基因大豆植株利用的原理是 植物细胞具有全能性植物细胞具有全能性。
（5）大豆过量表达转录因子后，油酸和亚油酸的含量显著提高，推测转录因子在细胞内发挥的作用的可能机理是 调控与油酸和亚油酸合成有关酶的基因的表达，进而促进其合成调控与油酸和亚油酸合成有关酶的基因的表达，进而促进其合成。
【答案】DNA半保留复制；所选限制酶识别的序列不能同时存在于氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因之中（限制酶不能同时切割氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因）；不能；维持稳定和表达；不能，有可能是导入了不含目的基因的P0质粒；脱分化；植物细胞具有全能性；调控与油酸和亚油酸合成有关酶的基因的表达，进而促进其合成
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/10 8:0:8组卷：2引用：1难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
