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λ噬菌体的遗传物质是双链线状DNA,其DNA两端的5′端是由12个碱基组成的互补黏性末端(cos位点),常作为基因工程的载体,转化频率比质粒高1000倍以上。如图是置换型λ噬菌体基因组的结构和连接过程的示意图,如表是若干种限制酶及其识别的序列,箭头处表示酶切位点。填充片段用于置换目的基因片段,其两端含有多个限制酶酶切位点。回答下列问题:
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ MobⅠ AclⅠ
识别的序列 G↓GATCC G↓AATTC ↓GATC AA↓CGTT
(1)λ噬菌体特异性感染大肠杆菌后,其DNA会迅速形成闭环结构,能形成闭环结构的原因是
λ噬菌体DNA两端的cos位点可碱基互补配对相互连接
λ噬菌体DNA两端的cos位点可碱基互补配对相互连接
。XbaⅠ识别的碱基序列是
5′-CTCGAG-3′
5′-CTCGAG-3′
。过程②利用
DNA聚合
DNA聚合
酶补平黏性末端,加入的核苷酸是
胸腺嘧啶脱氧核苷酸、胞嘧啶脱氧核苷酸
胸腺嘧啶脱氧核苷酸、胞嘧啶脱氧核苷酸

(2)置换载体用XbaⅠ切割并用脱氧核苷酸补平后,外源目的基因用表中的限制酶
BamHⅠ或MobⅠ
BamHⅠ或MobⅠ
处理,再用腺嘌呤脱氧核苷酸、鸟嘌呤脱氧核苷酸补平,经DNA连接酶处理后可将目的基因替换到λ噬菌体上。与不补平黏性末端相比,上述操作方法的优点是可以避免
①酶切后的λ噬菌体DNA的两个末端相连接,目的基因不能插入;②避免目的基因首尾连接
①酶切后的λ噬菌体DNA的两个末端相连接,目的基因不能插入;②避免目的基因首尾连接
(答出两点即可),从而提高目的基因与载体相连接的效率。
(3)表面展示技术是通过重组DNA技术,将外源蛋白与细胞表面的蛋白质组装成融合蛋白,从而可展示在细胞表面。凝集素与脂多糖结合,可发生凝集反应。研究人员将特异性识别蓝细菌表面脂多糖的凝集素(一种蛋白质),通过表面展示技术定位至芽孢杆菌的质膜上,这一技术实现了
凝集素特异性识别并结合蓝细菌,抑制蓝细菌繁殖
凝集素特异性识别并结合蓝细菌,抑制蓝细菌繁殖
,应用于修复水华现象。

【答案】λ噬菌体DNA两端的cos位点可碱基互补配对相互连接;5′-CTCGAG-3′;DNA聚合;胸腺嘧啶脱氧核苷酸、胞嘧啶脱氧核苷酸;BamHⅠ或MobⅠ;①酶切后的λ噬菌体DNA的两个末端相连接,目的基因不能插入;②避免目的基因首尾连接;凝集素特异性识别并结合蓝细菌,抑制蓝细菌繁殖
【解答】
【点评】
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发布:2024/7/27 8:0:9组卷:2引用:1难度:0.6
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  • 1.下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是(  )

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:6引用:1难度:0.7
  • 2.几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括
     
     

    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
  • 3.下列有关基因工程的叙述,正确的是(  )

    发布:2024/12/31 5:0:5组卷:3引用:2难度:0.7
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