Lon1蛋白酶具有降解叶绿体和线粒体内氧化蛋白、维持细胞正常代谢的功能。为揭示控制Lon1蛋白酶表达的蓝莓VcLon1基因的生物学功能，并为其他植物抗旱机制研究提供基础信息。科研工作者通过获得转基因本氏烟植株来进行干旱生理分析。回答下列问题：
（1）为获得VcLon1基因，科研人员用蓝莓基因组DNA为模版，根据 VcLon1 基因的核苷酸序列VcLon1 基因的核苷酸序列设计引物进行PCR扩增。PCR扩增的原理是 DNA的复制DNA的复制。在进行①过程时，选用两种酶同时切割是为了防止一种酶切割时造成 目的基因与载体反向连接/自身连接目的基因与载体反向连接/自身连接。
（2）在进行③过程时，需要用酒精溶液和 次氯酸钠（或氯化汞）次氯酸钠（或氯化汞）溶液进行消毒，最后使用无菌水清洗。在④过程中使用的培养基中需加入一定量的蔗糖，作用是 提供碳源，维持培养基的渗透压提供碳源，维持培养基的渗透压（答出2点即可）。
（3）在⑤过程中，将本氏烟细胞与农杆菌混合后共培养，旨在让目的基因进入本氏烟细胞，影响该过程成功的因素，除温度等环境因素外，还可能是 共培养时间；农杆菌的种类和活性等；受体细胞的生理状态等共培养时间；农杆菌的种类和活性等；受体细胞的生理状态等（答出2点即可）。除了本实验采用的方法，还可采用 电击法、基因枪法、花粉管通道法等电击法、基因枪法、花粉管通道法等法将VcLon1基因导入植物受体细胞。
（4）在⑦过程中，试管苗需要移栽至适宜的光照和温度下，并逐渐 降低降低湿度进行适应锻炼后方可移栽至自然环境中种植。
（5）科研人员经过检测发现在转基因烟草植株1-10中 33号植株未成功导入外源基因VcLon1，而WT植株则不能扩增出2982bp条带。随后利用了半定量PCR分析外源基因VcLon1在本氏烟中的表达，其结果如图2，因此后续可取 1、2、4、6-91、2、4、6-9号转基因本氏烟植株作为干旱生理分析的试验材料。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】VcLon1 基因的核苷酸序列；DNA的复制；目的基因与载体反向连接/自身连接；次氯酸钠（或氯化汞）；提供碳源，维持培养基的渗透压；共培养时间；农杆菌的种类和活性等；受体细胞的生理状态等；电击法、基因枪法、花粉管通道法等；降低；3；1、2、4、6-9
【解答】
【点评】
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发布：2024/9/28 1:0:2组卷：5引用：1难度：0.5
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
