猪源大肠杆菌会引起仔猪发生肠炎、肠毒血症等疾病。LTB和ST1是猪源大肠杆菌肠毒素基因，融合基因LTB-ST1的表达产物LTB-ST1融合蛋白可有效预防仔猪黄痢。构建融合基因的方法如图1所示。请回答：
（1）猪源大肠杆菌与猪细胞在结构上最主要的区别是 无以核膜为界限的细胞核无以核膜为界限的细胞核，猪源大肠杆菌与猪的种间关系为 寄生寄生。
（2）在对LTB基因与ST1基因进行PCR过程中，DNA解旋的方法是 高温高温，若引物中C或G的碱基数量越高，则复性的温度会 升高升高（选填“升高”、“降低”或“不变”）。
（3）图1中限制酶1使得LTB基因中的 磷酸二酯磷酸二酯键断裂。为保证经酶处理后的LTB基因与ST1基因能够正常连接，限制酶1与限制酶2在选取时需满足 以形成相同的黏性末端以形成相同的黏性末端的特点，可见这种融合基因的方法具有局限性。
（4）为突破限制酶选取的局限性，研究人员通过重组PCR技术构建了LTB-ST1融合基因，如图2所示，请回答：
①重组PCR技术依据的生物学原理是 DNA（半保留）复制DNA（半保留）复制。PCR1和PCR2需要在两个不同反应体系中进行的原因是 引物P2与P3可发生部分碱基互补配对，在同一个体系中无法正常完成复性过
程引物P2与P3可发生部分碱基互补配对，在同一个体系中无法正常完成复性过
程，两个反应体系中加入的物质中不同的是 引物、模板引物、模板。下列序列中符合引物P2与引物P3的5′末端碱基序列要求的是：ADAD。
A.5'ATCGGACTTG⋯3'
B.5'ATCGGAGAAC⋯3'
C.5′TAGCCTGAAC⋯3'
D.5′CAAGTCCGAT⋯3'
②重组PCR技术不仅可用于构建融合基因，还可用于研究基因定点突变。若要在两个基因连接处实现基因定点突变，可对 引物P2与P3引物P2与P3进行设计，后通过重组PCR，使新合成的DNA中含有突变位点，从而实现基因的定点突变。
程
程
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】无以核膜为界限的细胞核；寄生；高温；升高；磷酸二酯；以形成相同的黏性末端；DNA（半保留）复制；引物P2与P3可发生部分碱基互补配对，在同一个体系中无法正常完成复性过
程；引物、模板；AD；引物P2与P3
程；引物、模板；AD；引物P2与P3
【解答】
【点评】
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发布：2024/10/3 11:0:1组卷：15引用：1难度：0.5
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