纤维素酶广泛应用在纺织、能源、食品等领域,提高纤维素酶的热稳定性可提高反应温度,加快降解速度研究耐热纤维素酶在工业生产上具有重要意义。嗜热梭菌是一种高温厌氧细菌,其产生的β-葡萄糖苷酶(bglB)是一种耐热纤维素酶,科研人员将bglB基因转入大肠杆菌,构建了耐高温的纤维素酶大肠杆菌。回答下列问题:
(1)利用PCR扩增bglB基因时,每次循环一般分为变性、复性复性和 延伸延伸三步,其中变性的目的是 将双链DNA解聚为单链将双链DNA解聚为单链。
(2)如图1为质粒的限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒,bglB基因两端需要分别引入 NdeⅠNdeⅠ和 BamHⅠBamHⅠ限制酶的识别序列。将重组质粒导入大肠杆菌前,一般先用Ca2+处理大肠杆菌细胞,目的是 使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的状态使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的状态。

(3)将筛选到的转bglB基因大肠杆菌进行耐高温实验,结果如图2所示。在工业生产上,为提高纤维素降解速率,最好将温度控制在 6060℃。
【考点】基因工程的操作过程综合;DNA片段的扩增与电泳鉴定.
【答案】复性;延伸;将双链DNA解聚为单链;NdeⅠ;BamHⅠ;使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的状态;60
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/22 8:0:10组卷:1引用:2难度:0.5
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