转基因重组醇母乙肝疫苗是一种乙肝表面抗原（HBsAg）亚单位疫苗。选用组氨酸脱氢酶基因（His）缺失突变体的巴斯德华赤酵母作受体细胞，它能以甲醇作为唯一碳源，但需要在添加组氨酸的培养基上才能存活。下图所示质粒中的5'AOX1、3'AOX1（TT）是强启动子序列和终止子序列，请回答下列问题。
限制酶的识别序列和切割位点
| 限制酶 | SnaBⅠ | BglⅡ | Avrli | SacⅠ |
| 识别序列及切割位点 | 5'TACIGTA3' | 5'AIGATCT3' | 5'CICTAGG3' | 5'CITCGAG3' |
标记基因
标记基因
，有利于重组质粒的筛选。质粒中需具有多个限制酶切割位点，其作用是 以便与外源基因连接
以便与外源基因连接
。（2）据图和表分析，构建重组质粒时，HBsAg基因的B位置需接上
5'CCTAGG3'
5'CCTAGG3'
（填相应末端的碱基序列）。经过限制酶酶切的质粒与HBsAg基因在进行连接时，可选用 T4DNA连接酶
T4DNA连接酶
连接。（3）图中步骤1一般先用Ca2+处理大肠杆菌，使其处于
能吸收周围环境中DNA分子
能吸收周围环境中DNA分子
的生理状态。由步骤2的结果分析，步骤1将重组质粒先导入大肠杆菌有利于HBsAg基因在受体细胞中 增殖
增殖
。（4）步骤3中应选用限制酶
BglⅡ
BglⅡ
切割从大肠杆菌中分离的重组质粒，从而获得图示重组DNA片段，然后将其整合到His缺失突变体酵母细胞基因组中，在不含 组氨酸
组氨酸
的培养基中筛选出成功导入了HBsAg基因的酵母细胞。（5）与细菌相比，酵母菌更适宜作为受体细胞制备HBsAg亚单位疫苗，原因是
酵母菌为真核生物，具有内质网和高尔基体等细胞器，能够对蛋白质进行加工，而细菌没有各种细胞器（除了核糖体），不形成分泌蛋白
酵母菌为真核生物，具有内质网和高尔基体等细胞器，能够对蛋白质进行加工，而细菌没有各种细胞器（除了核糖体），不形成分泌蛋白
。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】标记基因；以便与外源基因连接；5'CCTAGG3'；T4DNA连接酶；能吸收周围环境中DNA分子；增殖；BglⅡ；组氨酸；酵母菌为真核生物，具有内质网和高尔基体等细胞器，能够对蛋白质进行加工，而细菌没有各种细胞器（除了核糖体），不形成分泌蛋白
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/6/12 8:0:8组卷：4引用：1难度：0.6
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
