抗增殖蛋白（pHb2）直接参与调控细胞增殖、凋亡和分化等多种细胞生物学进程，与肿瘤等疾病密切相关。为了解某动物pHb2抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，科研工作者获得了pHb2基因，并将其导入大肠杆菌，表达后获得了pHb2。回答下列问题：
（1）常用PCR技术扩增pHb2基因，该技术依据的原理是 DNA复制DNA复制。
（2）如图为所用载体示意图，其中的限制酶的识别序列及切割位点如表所示。质粒DNA含有启动子和终止子，终止子的化学本质是 DNADNA。据图分析，需要选用表中的限制酶 EcoRⅠ和PvitⅡEcoRⅠ和PvitⅡ切割含pHb2基因的DNA片段。经过这两种酶切割的pHb2基因和载体进行连接时，最好选用 T4DNAT4DNA（填“E.coli DNA”或“T4 DNA”）连接酶。
| 名称 | 识别序列及切割位点 | 名称 | 识别序列及切割位点 |
| HindⅢ | A↓AGCTT | EcoRⅠ | G↓AATTC |
| PvitⅡ | CAG↓CTG | PstⅠ | CTGC↓AG |
| KpnⅠ | G↓GTACC | BamHⅠ | G↓GATCC |
抗原—抗体杂交
抗原—抗体杂交
技术进行检测。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】DNA复制；DNA；EcoRⅠ和PvitⅡ；T4DNA；抗原—抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/20 8:0:9组卷：8引用：2难度：0.8
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（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
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