幽门螺杆菌（Hp）属于一类致癌物，Hp与胃炎、消化性溃疡和胃癌等多种疾病有关。Hp的Ipp20基因能合成其特有的Ipp20蛋白质，科研人员据此利用基因工程制备Hp疫苗，该过程所选择的质粒及操作步骤如图所示。回答下列问题：

（1）通过PCR扩增Ipp20基因的反应需要在

缓冲

缓冲

溶液中进行，扩增Ipp20基因时的基本条件包括DNA模板、原料、Taq DNA聚合酶、

引物

引物

等。
（2）在PCR反应体系中一般需要加入Mg²⁺，原因是

TaqDNA聚合酶需要Mg²⁺激活

TaqDNA聚合酶需要Mg²⁺激活

。科研人员探究了不同浓度的Mg²⁺对PCR扩增效果的影响，结果如表所示。科研人员认为PCR反应高效进行，Mg²⁺浓度并不是越高越好，据表分析，依据是

表中Mg²⁺浓度为4mmol•L^-1时，Ipp20基因相对含量最高，Mg²⁺浓度高于4mmol•L^-1时，Ipp20基因相对含量降低

表中Mg²⁺浓度为4mmol•L^-1时，Ipp20基因相对含量最高，Mg²⁺浓度高于4mmol•L^-1时，Ipp20基因相对含量降低

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Mg2+浓度/（mmol•L-1）	0	2	3	4	5	6
Ipp20基因相对含量	-	+	++	+++++	++++	+++

注：“-”表示未检测到Ipp20基因，“+”表示检测到Ipp20基因，且“+”越多，检测到的含量越多。
（3）已知在构建基因表达载体时使用了限制酶XhoⅠ和XbaⅠ切割质粒和Ipp20基因。科研人员采用了影印法筛选含有Ipp20基因的大肠杆菌，即使用无菌的线毡布压在培养基A（添加潮霉素）的菌落上，带出少许菌种，平移并压在培养基B（添加氯霉素）上。根据图示结果分析，含有Ipp20基因的大肠杆菌应从培养基

A

A

中获取，理由是

限制酶XhoⅠ和XbaⅠ切割后，重组质粒中不含有氯霉素抗性基因，因此含Ipp20基因的大肠杆菌不能在添加了氯霉素的培养基B中生长

限制酶XhoⅠ和XbaⅠ切割后，重组质粒中不含有氯霉素抗性基因，因此含Ipp20基因的大肠杆菌不能在添加了氯霉素的培养基B中生长

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