蒂蛀虫是荔枝的重要虫害,荔枝嫩叶受蛀时,中脉变褐色,干枯破裂;花穗受害,顶端枯死;果实被蛀,造成落果或品质下降。科研人员利用转基因抗虫荔枝的研究过程中,采用了图示质粒,其上有SalⅠ,HindⅢ和BamHⅠ三种限制酶切割位点。

(1)在构建重组质粒时,选用 SalⅠ、HindⅢSalⅠ、HindⅢ两种限制酶切割目的基因的两端及质粒,可防止 目的基因和质粒的自我环化或反向连接目的基因和质粒的自我环化或反向连接。
(2)用分别含有氨苄青霉素和四环素的培养基筛选农杆菌时,发现含有目的基因的农杆菌不能在含四环素的培养基上生长,这说明 抗四环素基因被破坏抗四环素基因被破坏。
(3)采用农杆菌感染荔枝细胞的优点是:农杆菌的Ti质粒含有一段T—DNA,能携带目的基因进入受体细胞,并将目的基因整合到受体细胞染色体的DNA上农杆菌的Ti质粒含有一段T—DNA,能携带目的基因进入受体细胞,并将目的基因整合到受体细胞染色体的DNA上。
(4)利用植物组织培养技术培育转基因抗虫荔枝植株,依据的原理是 植物细胞的全能性植物细胞的全能性。
(5)导入抗虫基因的荔枝是否可以表达其遗传特性,可利用 PCRPCR技术检测抗虫基因是否转录出mRNA,是否翻译出与抗虫有关的蛋白质则采用 抗原—抗体杂交抗原—抗体杂交技术,除上述分子水平检测外,还需进行个体水平上的抗虫性状鉴定,可用的方法是 用转基因荔枝嫩叶喂养蒂蛀虫,观察蒂蛀虫的存活情况用转基因荔枝嫩叶喂养蒂蛀虫,观察蒂蛀虫的存活情况。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】SalⅠ、HindⅢ;目的基因和质粒的自我环化或反向连接;抗四环素基因被破坏;农杆菌的Ti质粒含有一段T—DNA,能携带目的基因进入受体细胞,并将目的基因整合到受体细胞染色体的DNA上;植物细胞的全能性;PCR;抗原—抗体杂交;用转基因荔枝嫩叶喂养蒂蛀虫,观察蒂蛀虫的存活情况
【解答】
【点评】
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