农业上常用一定浓度的除草剂除去单子叶农作物中的双子叶杂草。农业科研人员将抗除草剂基因转入大豆，培育出抗除草剂大豆，培育过程中使用的质粒如图1所示，使用的含抗除草剂基因的DNA片段如图2所示，使用含抗除草剂基因的农杆菌对大豆细胞进行转化，并将该细胞培养成抗除草剂大豆幼苗的过程如图3所示。已知限制性内切核酸酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。请回答下列问题：
（1）质粒是独立于 真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，具有自我复制能力的环状双链DNA分子。构建基因表达载体时，可以用限制酶 BamHⅠ（或Sau3AⅠ）BamHⅠ（或Sau3AⅠ）（只写一种限制酶）切割质粒，用限制酶 Sau3AⅠSau3AⅠ（只写一种限制酶）切割含目的基因的DNA片段，这样切割的缺陷是 会出现质粒和抗除草剂基因的自身环化和反向连接会出现质粒和抗除草剂基因的自身环化和反向连接。
（2）将上述切开的质粒与抗除草剂基因混合，加入DNA连接酶连接后，导入大豆受体细胞（不考虑基因突变）。若将大豆受体细胞分别在含青霉素、四环素的培养基上培养，这些大豆受体细胞会出现都能生长，在含青霉素的培养基上不能生长，在含四环素的培养基上能生长在含青霉素的培养基上不能生长，在含四环素的培养基上能生长，都不能生长都不能生长三种情况。
（3）从个体生物学水平上，鉴定图3中转抗除草剂基因大豆幼苗是否抗除草剂的方法是 用一定浓度的除草剂喷洒在转抗除草剂基因大豆幼苗上，观察其生长状态用一定浓度的除草剂喷洒在转抗除草剂基因大豆幼苗上，观察其生长状态。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA；BamHⅠ（或Sau3AⅠ）；Sau3AⅠ；会出现质粒和抗除草剂基因的自身环化和反向连接；在含青霉素的培养基上不能生长，在含四环素的培养基上能生长；都不能生长；用一定浓度的除草剂喷洒在转抗除草剂基因大豆幼苗上，观察其生长状态
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/11 8:0:9组卷：6引用：2难度：0.4
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
