家禽的饲料中富含谷物，纤维素是谷物的重要成分，但家禽消化道中缺少能降解纤维素的酶，阻碍了家禽对饲料的吸收与利用。研究人员利用转基因技术改造乳酸杆菌，将其添加到饲料中，以提高家禽养殖效率。枯草芽孢杆菌能分泌一种可降解纤维素的酶，这种酶由W基因编码。为在乳酸杆菌中表达W基因，需使用图1中质粒作为载体，图2为含W基因的DNA片段。回答下列问题：
（1）常见的乳酸菌除乳酸杆菌外，还有 乳酸链球菌乳酸链球菌。家禽肠道内的乳酸杆菌可利用葡萄糖通过细胞呼吸产生酸性物质，抑制有害细菌的生长和繁殖，维持肠道的正常功能，请写出相关的反应式：C6H12O6酶2C3H6O3+能量C6H12O6酶2C3H6O3+能量。
（2）利用PCR技术扩增W基因时，用到的DNA聚合酶与普通的酶相比，具有的特点是 耐高温耐高温。扩增完成后，常采用 琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳法来鉴定PCR的产物。为得到含W基因的乳酸杆菌，可采用平板划线法纯化乳酸杆菌，进行划线操作要注意：从第一次划线的末端开始进行第二次划线；不要将最后一次的划线与第一次的划线相连；每次划线前要灼烧接种环；在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环从第一次划线的末端开始进行第二次划线；不要将最后一次的划线与第一次的划线相连；每次划线前要灼烧接种环；在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环（写出2点即可）。
（3）W基因以乙链为转录模板链，转录时mRNA自身延伸的方向为5'→3'。下表是几种限制酶的识别序列及切割位点，图1、图2标注了相关限制酶的酶切位点。为获得能正确表达W基因的重组质粒，应分别使用哪些限制酶对质粒和含W基因的DNA片段进行切割？质粒：限制酶HindⅢ、MfeⅠ；含W基因的DNA片段：限制酶HindⅢ、EcoRⅠ质粒：限制酶HindⅢ、MfeⅠ；含W基因的DNA片段：限制酶HindⅢ、EcoRⅠ。
酶
酶
| 限制酶 | EcoRⅠ | BamHⅠ | KpnⅠ | MfeⅠ | HindⅢ |
| 识别位点 | 5'-G↓AATTC-3' 3'-CTTAA↑G-5' |
5'-G↓GATCC-3' 3'-CCTAG↑G-5' |
5'-G↓GTACC-3' 3'-CCATG↑G-5' |
5'-C↓AATTG-3' 3'-GTTAA↑C-5' |
5'-A↓AGCTT-3' 3'-TTCGA↑A-5' |
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】乳酸链球菌；C6H12O62C3H6O3+能量；耐高温；琼脂糖凝胶电泳；从第一次划线的末端开始进行第二次划线；不要将最后一次的划线与第一次的划线相连；每次划线前要灼烧接种环；在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环；质粒：限制酶HindⅢ、MfeⅠ；含W基因的DNA片段：限制酶HindⅢ、EcoRⅠ
酶
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/11 8:0:9组卷：11引用：3难度：0.5
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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