图甲为构建重组质粒过程中的三种备选质粒，其中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因。图乙为培育转AFPs基因（抗冻基因）番茄的示意图，外源DNA和质粒上均标出了酶切位点及相关抗性基因，请回答下列问题。
（1）图甲中通常选用质粒C构建重组质粒，不选用质粒A的原因是 质粒A中没有标记基因质粒A中没有标记基因；复制原点处A和T特别多，其分子机理是 氢键相对少，不稳定，DNA容易解旋，容易和引物结合，作为复制起点氢键相对少，不稳定，DNA容易解旋，容易和引物结合，作为复制起点，不选用质粒B构建重组质粒的原因是 质粒B的复制原点中含有HindⅢ酶切位点，如选用HindⅢ酶作为限制酶，会破坏复制原点质粒B的复制原点中含有HindⅢ酶切位点，如选用HindⅢ酶作为限制酶，会破坏复制原点。
（2）据图乙分析，若成功构建重组质粒以利于筛选鉴定，应优先选用的两种限制酶分别是 BamHⅠBamHⅠ和 HindⅢHindⅢ切割目的基因和质粒，采用两种限制酶的另一优点是 避免目的基因和质粒被切割后自身环化避免目的基因和质粒被切割后自身环化。
（3）PCR技术的原理是 DNA半保留复制DNA半保留复制，通过PCR技术获取目的基因时需设计 22种引物，引物是一小段 能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。
（4）图乙农杆菌中的质粒应含有T-DNA，其作用是 携带目的基因进入番茄细胞并整合到番茄细胞的染色体DNA携带目的基因进入番茄细胞并整合到番茄细胞的染色体DNA。若要获得抗冻能力更强的抗冻番茄，可以对AFPs基因进行改造，最终得到相应的蛋白质，该过程需用到 蛋白质蛋白质工程。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】质粒A中没有标记基因；氢键相对少，不稳定，DNA容易解旋，容易和引物结合，作为复制起点；质粒B的复制原点中含有HindⅢ酶切位点，如选用HindⅢ酶作为限制酶，会破坏复制原点；BamHⅠ；HindⅢ；避免目的基因和质粒被切割后自身环化；DNA半保留复制；2；能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸；携带目的基因进入番茄细胞并整合到番茄细胞的染色体DNA；蛋白质
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/10 8:0:9组卷：0引用：1难度：0.5
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
