癌症患者进行化疗后，体内白细胞数量会大幅降低，可注射GM-CSF（一种细胞因子）以增加白细胞数量。某科研团队通过基因工程技术大量生产GM-CSF，满足了临床需求。相关限制酶的酶切位点如图所示。
回答下列问题。
（l）体外大量获得GM-CSF基因的方法是 PCRPCR，用该方法获取GM-CSF基因的过程中需要加入一对引物，其作用是 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸。
（2）据图分析，该科研团队构建GM-CSF基因表达载体时，不选择限制酶BamHⅠ的原因是 该酶会破坏GM-CSF基因该酶会破坏GM-CSF基因；与只选择EcoRⅠ相比，选择PstⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理目的基因和质粒的优点是 防止GM-CSF基因、质粒的自身环化，防止反向连接防止GM-CSF基因、质粒的自身环化，防止反向连接。
（3）将GM-CSF基因表达载体导入大肠杆菌前，一般先用Ca2+处理大肠杆菌的目的是 使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
（4）该科研团队利用质粒中的标记基因筛选出含有GM-CSF基因重组质粒的大肠杆菌。筛选时，应先用含有 氨苄青霉素氨苄青霉素的培养基1筛选已导入质粒的大肠杆菌，再将培养基1中的菌落分别单独接种到含 四环素四环素的培养基2中进行筛选。若在培养基2中未形成菌落，则其在培养基l中形成的对应菌落是由含重组质粒的大肠杆菌繁殖而成的。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】PCR；使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸；该酶会破坏GM-CSF基因；防止GM-CSF基因、质粒的自身环化，防止反向连接；使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态；氨苄青霉素；四环素
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/11 8:0:9组卷：5引用：1难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
