重组PCR技术是一项新的PCR技术,通过重组PCR技术能将两个不同的DNA连接成为一个新DNA分子。某科研小组从猪源大肠杆菌中扩增得到LTB和ST1两个基因片段,利用重组PCR技术构建了LTB—ST1融合基因,制备过程如图1所示。回答下列问题:

(1)利用PCR技术扩增目的基因的过程中,向反应体系中加入的物质除了引物和模板链,还需要加入 耐高温DNA聚合酶和4种脱氧核苷酸耐高温DNA聚合酶和4种脱氧核苷酸。
(2)从P2,P3两种引物的角度分析,LTB和ST1基因能够融合的关键是 这两种引物的部分区域能进行碱基互补配对这两种引物的部分区域能进行碱基互补配对。PCR1和PCR2不能在同一个反应体系中进行,原因是 P2和P3能结合,会干扰引物和模板链的结合,影响PCR过程P2和P3能结合,会干扰引物和模板链的结合,影响PCR过程。②过程不需要加入引物,原因是 两条母链可作为合成子链的引物两条母链可作为合成子链的引物。
(3)科研小组为了检测是否成功构建出融合基因,将反应后体系中的各种DNA分子进行电泳,结果如图2所示。则融合基因最可能是 33,判断依据是 融合基因包含2个不同的基因,其分子量较大,3表示的DNA分子量最大融合基因包含2个不同的基因,其分子量较大,3表示的DNA分子量最大。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定.
【答案】耐高温DNA聚合酶和4种脱氧核苷酸;这两种引物的部分区域能进行碱基互补配对;P2和P3能结合,会干扰引物和模板链的结合,影响PCR过程;两条母链可作为合成子链的引物;3;融合基因包含2个不同的基因,其分子量较大,3表示的DNA分子量最大
【解答】
【点评】
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发布:2024/8/8 8:0:9组卷:16引用:2难度:0.7
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