盐胁迫会影响植物的生长，可用转基因技术提高植物的耐盐能力。mybx是响应盐胁迫的关键转录因子，其功能缺失突变体对150mmol•L^-1的NaCl高度敏感。HKT1基因表达的Na⁺转运蛋白介导Na⁺从木质部导管到木质部薄壁细胞的运输，减少木质部的Na⁺含量，从而提高植物的耐盐能力。科研人员构建HKT1基因的表达载体获得HKT1基因表达菌体，构建过程如图所示。四种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。回答下列问题：

限制酶	HindⅢ	BamHⅠ	XhoⅠ	BglⅡ
识别序列及切割位点	A↓AGCTT	G↓GATCC	C↓TCGAG	A↓GATCT

（1）将拟南芥细胞破碎提取RNA时，需要在溶液中加入

RNA酶抑制剂

RNA酶抑制剂

，以防止RNA降解。过程③要选择合适的限制酶切割含HKT1基因的DNA片段，应选用的表中的限制酶是

HindⅢ、XhoI

HindⅢ、XhoI

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（2）过程⑤将重组质粒导入大肠杆菌。在筛选含有HKT1基因的大肠杆菌时，除必要的营养物质，还需要在培养基中添加

卡那霉素

卡那霉素

。提取重组质粒A将其导入农杆菌，用农杆菌侵染拟南芥mybz突变体花序，农杆菌的作用是

携带HKT1基因进入拟南芥细胞，并使HKT1基因在细胞内维持稳定和表达

携带HKT1基因进入拟南芥细胞，并使HKT1基因在细胞内维持稳定和表达

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（3）检测转HKT1基因拟南芥mybr突变株是否表达出Na⁺转运蛋白时，可用

抗原―抗体杂交

抗原―抗体杂交

技术进行检测。若Na⁺转运蛋白高度表达，还需要进一步鉴定其抗性程度，实验的思路是

将转基因突变株种植在施加了浓度为150mmol•L^-1的NaCl溶液的土壤中，检测木质部薄壁细胞的含盐量和植株的生长状况

将转基因突变株种植在施加了浓度为150mmol•L^-1的NaCl溶液的土壤中，检测木质部薄壁细胞的含盐量和植株的生长状况

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