高等植物中的乙烯生物合成受到发育阶段和环境的共同调节，其中乙烯合成酶在这一过程中起到至关重要的作用。拟南芥乙烯合成酶相关基因主要有两种：AtACS4和AtACS5。为研究以上基因表达水平与发育阶段的关系，科学家将AtACS4和AtACS5的启动子分别和GUS报告基因融合，并转入拟南芥。图1为使用的载体图谱，kanr为卡那霉素抗性基因，Ampr为氨苄青霉素抗性基因。回答下列问题：
（1）构建重组DNA分子：取足量的拟南芥叶片并提取 DNADNA，通过 PCR扩增PCR扩增得到两种启动子片段的拷贝，为使启动子正确插入载体，在获得的启动子两端分别引入 PvuⅡPvuⅡ和 HindⅢHindⅢ两种不同限制酶的识别序列，再用 限制性内切核酸酶、DNA连接限制性内切核酸酶、DNA连接酶处理启动子与表达载体获得重组DNA分子。
（2）农杆菌转化拟南芥：将两种重组DNA分子分别导入农杆菌，后将转化的农杆菌分别置于添加了 卡那霉素卡那霉素的LB液体培养基中进行培养。为确定培养所得农杆菌确实转入了重组DNA分子，可以通过 PCRPCR进行检测。后将转基因农杆菌与消毒后的拟南芥叶片共同培养，将共同培养后的烟草叶片转入含有营养物以及 氨苄青霉素、植物激素氨苄青霉素、植物激素的 MSMS培养基（填写培养基名称）中脱菌、诱导培养和筛选。经过发芽和生根培养后的组培苗需进行炼苗，炼苗的作用是 提高试管苗对外部环境的适应能力提高试管苗对外部环境的适应能力。
（3）拟南芥乙烯合成酶的表达特点：使用GUS染液染色后，具GUS基因表达产物的部位会现蓝色，用肉眼或在显微镜下可看到，且在一定程度下根据染色深浅可反映出GUS基因的表达水平。使用GUS染液对不同发育阶段的两种转基因拟南芥进行染色。AtACS4和AtACS5的启动子和GUS报告基因融合后进行转化获得的转基因拟南芥经过GUS染色后的实验结果依次为图2的A、B。可以推测AtACS4和AtACS5的表达特点为 AtACS4在成熟植株的叶片中表达量较高/AtACS5在幼嫩植株的叶片中表达量较高/AtACS4在幼嫩植株根中不表达，在成熟植株根中表达/两种基因在拟南芥的任何生长时期都有表达AtACS4在成熟植株的叶片中表达量较高/AtACS5在幼嫩植株的叶片中表达量较高/AtACS4在幼嫩植株根中不表达，在成熟植株根中表达/两种基因在拟南芥的任何生长时期都有表达。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】DNA；PCR扩增；PvuⅡ；HindⅢ；限制性内切核酸酶、DNA连接；卡那霉素；PCR；氨苄青霉素、植物激素；MS；提高试管苗对外部环境的适应能力；AtACS4在成熟植株的叶片中表达量较高/AtACS5在幼嫩植株的叶片中表达量较高/AtACS4在幼嫩植株根中不表达，在成熟植株根中表达/两种基因在拟南芥的任何生长时期都有表达
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/8/6 8:0:9组卷：6引用：2难度：0.5
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
