人乳铁蛋白（hLF）对细菌、真菌和病毒等有抑制作用。研究人员开展了如图所示的有关人乳铁蛋白基因的研究，图中AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相关限制酶的切割位点，neoR为新霉素抗性基因，BLG基因为β-乳球蛋白基因，GFP基因为绿色荧光蛋白基因。请回答下列问题：
（1）过程①中，不能从人肌肉细胞中提取RNA用于RT-PCR，是因为 hLF基因在人肌肉细胞中不表达hLF基因在人肌肉细胞中不表达。在RT-PCR过程中，加入的引物需在5′端添加 SalⅠSalⅠ和 BamHⅠBamHⅠ两种限制酶的识别序列，以便于hLF基因插入pEB质粒中。
（2）过程②中，hLF基因插入BLG基因之后的目的是 使人乳铁蛋白基因在山羊的乳腺细胞中表达使人乳铁蛋白基因在山羊的乳腺细胞中表达。过程③中，使用人工膜制成的脂质体将重组质粒导入受体细胞，依据的主要原理是 生物膜具有流动性生物膜具有流动性。
（3）利用荧光显微镜观察山羊乳腺上皮细胞 是否发绿色荧光是否发绿色荧光，以筛选出转化成功的细胞。
（4）要获得转基因山羊，还需要将hLF基因成功表达的乳腺上皮细胞的细胞核移植到山羊 去核的卵母去核的卵母细胞中，再借助 早期胚胎培养早期胚胎培养和 胚胎移植胚胎移植技术培育出转基因山羊。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】hLF基因在人肌肉细胞中不表达；SalⅠ；BamHⅠ；使人乳铁蛋白基因在山羊的乳腺细胞中表达；生物膜具有流动性；是否发绿色荧光；去核的卵母；早期胚胎培养；胚胎移植
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/18 8:0:10组卷：9引用：1难度：0.5
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
